Galvenā atšķirība starp mikrokodolu un komētas testu ir tāda, ka mikrokodolu tests ir svarīgs, lai pārbaudītu hromosomu bojājumus mutagēna iedarbības rezultātā, savukārt komētas tests ir svarīgs, lai noteiktu primāro DNS bojājumu atsevišķās šūnās.
Genotoksicitātes testi palīdz novērtēt mutāciju un hromosomu anomāliju iespējas. Genotoksīni ietver ķīmiskas vielas un starojumu. Kancerogēni, mutagēni un teratogēni ir galvenās genotoksīnu kategorijas. Tie izraisa dažādus bojājumus, piemēram, punktu mutācijas, dzēšanas, vienas un divu virkņu pārtraukumus, hromosomu aberācijas, mikrokodolu veidojumus, DNS remontu un šūnu cikla mijiedarbību. Šādi apstākļi var izraisīt dažādas slimības, un genotoksicitātes testi novērš iespējamo kaitējumu no šiem apstākļiem. Mikrokodolu tests un komētas tests ir divas metodes genotoksicitātes pārbaudēs.
Kas ir Micronucleus Assay?
Mikrokodolu tests ir tests, lai novērtētu hromosomu bojājumus mutagēna iedarbības rezultātā. Tas ir svarīgi, pārbaudot ķīmiskas vielas, kas izraisa vārpstas veidošanos un mikrokodolus. Mikrokodolu tests sniedz informāciju par ķīmisko vielu stabilitāti, traucējot hromosomu struktūru un funkciju. Mikrokodolu testos daudziem kancerogēniem ir pozitīvi rezultāti. Pārbaudes process ietver ķīmisku apstrādi un mikrokodolu šūnu biežuma mērīšanu. Ja ir neparasti palielināts mikrokodolu šūnu skaits, tiek secināts, ka ķīmiskā viela izraisa hromosomu bojājumus.
Mikrokodolu testu parasti veic šūnām, kas aktīvi dalās. Tāpēc eritrocīti un kaulu smadzeņu cilmes šūnas, kas iegūtas, daloties šūnām, ir ideāli piemēroti šādām pārbaudēm. Viņi piedzīvo pastāvīgu un strauju apgrozījumu. Tā kā eritrocītiem nav īstu kodolu, tas padara mikrokodolu šūnas labāk redzamas testa beigās.
Attēls 01: Mikrokodolu testa novērojumi
Mikrokodolu testi ir ekonomiski, ātrāki, ērti, un to veikšanai ir nepieciešams mazāk prasmju. Tie ātri un uzticamā veidā atspoguļo hromosomu aberācijas un ir ļoti noderīgi, lai ātri novērtētu hromosomu bojājumus. Īpašs un daudzpusīgs mikrokodolu testa veids ir citokinēzes bloka mikrokodolu citoma (CBMNcyt) tests. Tas ir vēlamais tests, lai izmērītu hromosomu bojājumus un nestabilitāti šūnās. Tomēr galvenā problēma, izmantojot mikrokodolu testu, ir tā, ka tā nespēj noteikt dažāda veida hromosomu aberācijas, un tests ietekmē mitotisko ātrumu un šūnu nāves proporciju, izraisot rezultātu izmaiņas.
Kas ir Comet Assay?
Komētas tests, kas pazīstams arī kā viena gēla elektroforēzes tests, ir vienkārša un jutīga metode DNS bojājumu noteikšanai. Tas mēra DNS pārtraukumus eikariotu šūnās un ir standarta paņēmiens biomonitoringam un genotoksicitātes testēšanai.
Komētas tests ir saistīts ar šūnu iekapsulēšanu agarozes suspensijā ar zemu kušanas temperatūru, šūnu lizēšanu neitrālos vai sārmainos apstākļos un suspendētu lizētu šūnu elektroforēzi. Iekapsulēšanas procesā šūnas tiek suspendētas izkausētā agarozē ar zemu kušanas temperatūru, un agaroze veido ogļhidrātu šķiedru matricu, lai tās nostiprinātu vietā. Agaroze ir osmotiski neitrāla; tādēļ tas ļauj šķīdumiem iekļūt caur gēlu un ietekmēt šūnas, tās netraucējot un nepārvietojot. Lizes šķīdums ir ļoti koncentrēts sāls ūdens šķīdums un mazgāšanas līdzeklis. Šis sāls izjauc olb altumvielas un savienošanās modeļus šūnā, vienlaikus izjaucot RNS saturu šūnā. Šūnas iznīcina, un visas olb altumvielas, RNS, citoplazmas un nukleoplazmas sastāvdaļas izjauc un izkliedējas agarozes matricā, atstājot DNS.
2. attēls: Komētas pārbaude
Elektroforēzes šķīdums ir sārmains šķīdums, kurā DNS dubultspirāle denaturējas un nukleoīds kļūst vienpavedienu. Šī procesa laikā attēlu analīzei tiek izmantots elektriskais lauks. Attēla analīze mēra kopējo DNS un nukleoīda fluorescences intensitāti un salīdzina abus. Kopējā struktūra atgādina komētu ar apļveida galvu, kas atbilst atlikušajai nebojātajai DNS, un asti bojātajai DNS. Jo spilgtāka un garāka aste spēcīgāku signālu dēļ, jo augstāks ir bojājumu līmenis.
Kādas ir līdzības starp mikrokodolu un komētas testu?
- Mikrokodolu un komētas tests ir ekonomisks, ātrāks, ērts un prasa mazāk prasmju.
- Tās galvenokārt tiek veiktas ar DNS.
- Abi testi palīdz novērtēt mutācijas un hromosomu anomālijas.
- Turklāt abās metodēs procedūras veikšanai tiek izmantotas ķīmiskas vielas.
Kāda ir atšķirība starp mikrokodolu un komētas testu?
Mikrokodolu tests ir svarīgs, lai pārbaudītu hromosomu bojājumus mutagēna iedarbības rezultātā, savukārt komētas tests ir svarīgs, lai noteiktu primāros DNS bojājumus atsevišķās šūnās. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp mikrokodolu un komētas testu. Turklāt mikrokodolu tests ir labi izveidots, lai noteiktu klastogenitāti un aneugenitāti. Komētas testu izmanto kā genotoksicitātes testu, lai noteiktu primāros DNS bojājumus šūnās. Turklāt mikrokodolu tests sniedz informāciju par ķīmisko vielu stabilitāti, savukārt komētas tests ir vienas šūnas gēla elektroforēze.
Tālāk esošajā infografikā tabulas veidā ir parādītas atšķirības starp mikrokodolu un komētas testu, lai tos varētu salīdzināt.
Kopsavilkums - mikrokodolu un komētas tests
Genotoksicitātes testi palīdz novērtēt mutāciju un hromosomu anomāliju iespējas. Mikrokodolu tests un komētas tests ir divas metodes genotoksicitātes pārbaudēs. Mikrokodolu tests novērtē hromosomu bojājumus mutagēna iedarbības rezultātā. Komētas pārbaude ir vienkārša un jutīga metode DNS bojājumu noteikšanai. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp mikrokodolu un komētas testu. Mikrokodolu tests ir svarīgs, lai pārbaudītu ķīmiskās vielas, kas izraisa vārpstas veidošanos un mikrokodolus. Komētas tests ir saistīts ar šūnu iekapsulēšanu agarozes suspensijā ar zemu kušanas temperatūru, šūnu lizēšanu neitrālos vai sārmainos apstākļos un suspendētu lizētu šūnu elektroforēzi.
