Galvenā atšķirība starp elektroporāciju un mikroinjekciju ir tāda, ka elektroporācija ir paņēmiens, kurā DNS ievadīšanai saimniekšūnās izmanto augstsprieguma elektrisko impulsu, savukārt mikroinjekcija ir metode, kurā DNS ievadīšanai tiek izmantota smalka stikla adata vai mikropipete. saimniekšūnas.
Transformācija ir process, kurā svešā DNS tiek pārnesta uz saimniekšūnām. Pārveidojot, var mainīt organisma ģenētisko uzbūvi. Ir dažādas ķīmiskās, bioloģiskās un fizikālās transformācijas metodes. Dažas ir tiešas metodes, bet dažas ir netiešas metodes. Elektroporācija un mikroinjekcija ir divas fiziskas metodes, kas ir tiešas transformācijas metodes. Elektroporācija izmanto elektrisko lauku, lai izraisītu mikroskopiskas poras bioloģiskajās šūnu membrānās, lai iekļautu DNS saimniekšūnās. Savukārt mikroinjekcija tieši ievada DNS, izmantojot mikropipeti vai stikla adatu ar smalku galu.
Kas ir elektroporācija?
Elektroporācija ir transformācijas paņēmiens, kas ievada DNS augu šūnās un protoplastos. Šī tehnika izmanto augstsprieguma elektrisko impulsu. Augu materiālus inkubē buferšķīdumā ar DNS. Pēc tam šķīdumu pakļauj augstsprieguma elektriskajam impulsam. Augu šūnu membrānās tiek izveidotas augstsprieguma inducētas poras, un caur šīm porām DNS migrē šūnās un integrējas ar augu genoma DNS. Šīs metodes efektivitāte ir atkarīga no augu materiāliem un apstrādes apstākļiem.
Attēls 01: elektroporācija
Kad transformācija tiek veikta, izmantojot elektroporāciju, tikai 40 līdz 50 % šūnu saņem DNS. Turklāt tikai 50% transformēto šūnu var izdzīvot ar šo metodi. Tomēr šī metode ir viegli izpildāma un nemaina šūnu bioloģisko struktūru vai funkcijas. Turklāt to var izmantot plašam šūnu klāstam.
Kas ir mikroinjekcija?
Mikroinjekcija ir transformācijas metode, kas ir īpaši noderīga, ievadot DNS lielās šūnās. Šī metode izmanto smalku stikla adatu vai mikropipeti, lai ievadītu DNS augu protoplastos vai dzīvnieku šūnās (olšūnās, olās un embrijos). Faktiski šī metode ir vairāk piemērota transgēnu dzīvnieku, piemēram, peļu, iegūšanai. Izmantojot šo metodi, DNS tiek iekļauta tieši kodolā vai citoplazmā.
Līdzīgi elektroporācijai, mikroinjekcija ir tiešās transformācijas paņēmiens. Mikroinjekciju veic specializētā mikroskopa iestatījumos. Datorizēta pipetes, adatas, mikroskopa skatuves un video tehnoloģiju turēšanas kontrole ir palielinājusi šīs tehnikas efektivitāti. Injicējot DNS, var izmantot krāsvielu, lai viegli identificētu pārveidotās šūnas. Tāpēc transformēto šūnu identificēšanai nav nepieciešams izmantot atsevišķu metodi. Vissvarīgākais ir tas, ka mikroinjekcijas procedūrai nav nepieciešams marķiera gēns.
2. attēls: mikroinjekcija
Turklāt šī metode ir ļoti efektīva un atkārtojama. Tomēr šī metode ir dārga, laikietilpīga un prasa kvalificētas personas. Turklāt ar šo metodi var apstrādāt tikai nelielu skaitu šūnu.
Kādas ir līdzības starp elektroporāciju un mikroinjekciju?
- Gan elektroporācija, gan mikroinjekcija ir divu veidu transformācijas metodes.
- Šīs metodes DNS ievada augu šūnās un protoplastos.
- Tās ir tiešās metodes.
- Turklāt tās ir fiziskas vai mehāniskas metodes.
- Abas metodes ir noderīgas, ražojot transgēnus augus un dzīvniekus.
Kāda ir atšķirība starp elektroporāciju un mikroinjekciju?
Elektroporācijas tehnikā DNS ievadīšanai tiek izmantots elektriskais lauks, savukārt mikroinjekcijas metode ir mikropipete vai stikla adata ar smalku galu DNS ievadīšanai. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp elektroporāciju un mikroinjekciju. Turklāt elektroporāciju galvenokārt izmanto augu šūnām un protoplastiem, savukārt mikroinjekciju galvenokārt izmanto dzīvnieku šūnām. Turklāt elektroporācija nav tik laikietilpīga kā mikroinjekcija.
Tālāk esošajā infografikā tabulas veidā ir apkopotas atšķirības starp elektroporāciju un mikroinjekciju.
Kopsavilkums - elektroporācija pret mikroinjekciju
Elektroporācija un mikroinjekcija ir divas fiziskas gēnu pārneses metodes. Elektroporācija izmanto augstsprieguma elektrisko lauku, savukārt mikroinjekcijā tiek izmantota stikla adata vai mikropipete. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp elektroporāciju un mikroinjekciju. Tomēr abas metodes tieši ievada eksogēnu DNS saimniekšūnās.
