Galvenā atšķirība starp Bredforda un Lowry proteīna testu ir tāda, ka Bredfordas proteīna tests ir balstīts uz krāsas Coomassie brilliant blue G-250 absorbcijas nobīdi, savukārt Lowry proteīna tests ir balstīts uz vara jonu (Cu+) jonu reakciju. ko iegūst, oksidējot peptīdu saites ar Folin-Cioc alteu reaģentu.
Pārbaude ir analītiska metode, kas palīdz raksturot parauga galvenās funkcionālās sastāvdaļas. Tādējādi tests var būt vai nu kvalitatīvs, vai kvantitatīvs tests. Daudzās jomās, tostarp laboratorijas medicīnā, farmakoloģijā, vides bioloģijā, molekulārajā bioloģijā, bioķīmijā un imunoloģijā, šāda veida pārbaudes tiek izmantotas regulāri. Bredforda un Lowry proteīna tests ir divi bioķīmiskie testi, kas nosaka proteīna koncentrāciju parauga šķīdumā. Abos testos tiek izmantotas kolorimetriskās metodes, lai iegūtu rezultātus.
Kas ir Bredfordas proteīna tests?
Bradfordas proteīna tests ir ātra spektroskopiskā analītiskā procedūra proteīnu analīzei. Tas parāda augstu precizitāti, mērot olb altumvielu koncentrāciju šķīdumā. Mariona Bredforda šo procedūru ieviesa 1976. gadā. Šajā testā kopējā reakcija ir balstīta uz izmērīto proteīnu aminoskābju sastāvu. Citiem vārdiem sakot, Bredfordas proteīna tests ir kolorimetrisks tests. Tas izmanto krāsvielu Coomassie brilliant blue. Tādējādi šis kolorimetriskā proteīna tests ir atkarīgs no krāsvielas absorbcijas nobīdes. Coomassie brilliant blue G-250 ir trīs formātos: katjonu (sarkans), anjonu (zils) un neitrāls (zaļš). Skābos apstākļos krāsvielas sarkanā forma pārvēršas zilā krāsā. Tas apstiprina proteīna saistīšanos. Ja proteīna nav, šķīdums var palikt brūnā krāsā.
01. attēls: Bredfordas proteīna tests
Bradfordas proteīna tests atšķiras no citiem proteīna testiem, jo tas ir mazāk jutīgs pret dažādu olb altumvielu šķīdumā esošo ķīmisko savienojumu traucējumiem. Šie savienojumi ietver nātriju, kāliju, glikozi un saharozi utt.
Kas ir Lowry Protein Assay?
Lowry proteīna tests ir bioķīmisks tests, ko izmanto, lai noteiktu kopējo olb altumvielu līmeni šķīdumā. Olivers H. Lourijs ir persona, kas 1940. gadā izstrādāja šo reaģentu. Procedūra attēlo kopējo proteīna koncentrāciju šķīdumā ar krāsas maiņu, kas ir proporcionāla proteīna koncentrācijai šķīdumā. Tādējādi šis ir arī kolorimetrisks proteīna tests.
Šīs procedūras pamatā ir reakcija starp vara joniem (Cu+), kas rodas, oksidējot peptīdu saites, un Folina-Čok altē reaģentu. Turklāt šis reaģents satur fosfomolibdīnskābi un fosfor-volframskābi. Tomēr Lowry proteīna testa reakcijas mehānisms nav labi saprotams. Bet tas ir saistīts ar cisteīna, triptofāna un tirozīna atlikumu oksidēšanu, reducējot Folin-Cioc alteu reaģentu.
2. attēls: Lourī proteīna tests
Cisteīna atlikumi veicina Lowry proteīna testā novēroto absorbciju, un reakcijas rezultātā veidojas izcili zila molekula; heteropolimolibdēna zils. Šīs molekulas samazināšanos mēra ar absorbciju pie 660 nm. Tādējādi cisteīna un triptofāna atlieku koncentrācija, kas samazināja Folin-Cioc alteu reaģentu, nosaka kopējo proteīna koncentrāciju šķīdumā.
Kādas ir Bredfordas un Lourija proteīna testa līdzības?
- Bredforda un Lourija proteīna testi nosaka proteīna koncentrāciju šķīdumā.
- Abas metodes ir kolorimetriskās metodes.
- Abu metožu jutīgums ir arī augsts.
Kāda ir atšķirība starp Bredforda un Lourija proteīna testu?
Bradfordas un Lourī proteīna tests ir divu veidu testi, kas nosaka olb altumvielu koncentrāciju šķīdumā. Bredfordas proteīna tests balstās uz krāsas Coomassie brilliant blue G-250 absorbcijas nobīdi, savukārt Lowry proteīna tests ir atkarīgs no vara jonu reakcijas, ko rada peptīdu saišu oksidēšana, ar Folin-Cioc alteu reaģentu. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp Bredforda un Lowry proteīna testu. Bredfordas proteīna tests prasa 15 minūtes, lai iegūtu rezultātu, savukārt Lowery proteīna tests prasa 40–60 minūtes, lai iegūtu rezultātu. Tādējādi šī ir vēl viena atšķirība starp Bredfordas un Lovrija proteīna testu. Turklāt Bredfordas proteīna tests ir atkarīgs no aminoskābju sastāva, savukārt Lowry proteīna tests ir daļēji atkarīgs no aminoskābju sastāva. Tādējādi šī ir arī atšķirība starp Bredforda un Lourija proteīna testu.
Tālāk sniegtā informācija sniedz sīkāku informāciju par atšķirību starp Bredforda un Lourija proteīna testu.
Kopsavilkums - Bredforda vs Lourija proteīna tests
Pārbaude ir analītiska metode, ko izmanto, lai raksturotu parauga galveno funkcionālo komponentu. Bredforda un Lowry proteīna tests ir divu veidu proteīnu testi, kas darbojas ar kolorimetriskām metodēm. Gan Bredfordas, gan Lowry proteīnu testi nosaka olb altumvielu koncentrāciju šķīdumā. Tomēr galvenā atšķirība starp Bredforda un Lowry Protein Assay ir to izmantotā kolorimetriskā tehnika. Bredfordas proteīna testā izmanto Coomassie brilliant blue G-250, savukārt Lowry proteīna testā izmanto vara jonu (Cu+) jonus un Folin-Cioc alteu reaģentu. Turklāt Bredfordas metode sniedz ātrākus rezultātus nekā Lowry proteīna tests. Tomēr abas metodes ir ļoti jutīgas metodes, un tās var ietekmēt dažādas vielas.
