Galvenā atšķirība starp pBR322 un pUC19 ir tāda, ka pBR322 ir plazmīdu vektors, kura garums ir 4361 bāzes pāri, savukārt pUC19 ir plazmīdu vektors, kura garums ir 2686 bāzes pāri.
Klonēšanas vektors ir neliels DNS gabals, ko organismā var uzturēt stabili. Tas ir arī neliels DNS gabals, kurā klonēšanas nolūkos var ievietot svešu DNS fragmentu. Vektors satur svarīgas funkcijas, kas ļauj ērti ievietot svešu DNS fragmentu vektoros, piemēram, restrikcijas vietas, atlasāmu marķieri, reportiera gēnu un ekspresijas elementu. Klonēšana vispirms tika veikta, izmantojot E.coli. E. coli klonēšanas vektori ietver plazmīdas, bakteriofāgus, kosmīdus un baktēriju mākslīgās hromosomas (BAC). Visbiežāk izmantotie vektori ir ģenētiski modificētas plazmīdas. pBR322 un pUC19 ir divu veidu plazmīdu vektori.
Kas ir pBR322?
pBR322 ir plazmīdas vektors. Tas ir viens no pirmajiem plaši izmantotajiem E. coli klonēšanas vektoriem. Šis vektors pirmo reizi tika izveidots 1977. gadā Herberta Boijera laboratorijā Kalifornijas Universitātē, Sanfrancisko. Tā ir apļveida divpavedienu DNS, kuras garums ir 4361 bāzes pāri.
Attēls 01: pBR322
Šim plazmīdu vektoram ir īpašas funkcijas. Parasti tam ir divi rezistences pret antibiotikām gēni: gēns bla, kas kodē ampicilīna rezistenci (AmpR) un gēns tetA, kas kodē tetraciklīna rezistenci (TetR).) olb altumvielas. Turklāt tas satur pMB1 replikācijas izcelsmi. Šim plazmīdas vektoram ir arī rop gēns, kas kodē plazmīdas kopiju skaita ierobežotāju. Turklāt šim vektoram ir unikālas restrikcijas vietas vairāk nekā 40 restrikcijas enzīmiem. Vienpadsmit no šīm četrdesmit ierobežojuma vietām atrodas TetR gēnā. TetR gēna promotorā ir divas restrikcijas enzīmu HindIII un ClaI restrikcijas vietas. Turklāt AmpR gēnā ir sešas ļoti svarīgas restrikcijas vietas. pBR322 ir zema kopiju skaita klonēšanas vektors. Tas nodrošina aptuveni 20 plazmīdu kopijas uz vienu baktēriju šūnu. Vektora molekulmasa ir 2,83×106 d altoni.
Kas ir pUC19?
pUC19 ir plazmīdu vektors, kura garums ir 2686 bāzes pāri. Tā ir viena no plazmīdu vektoru sērijām, ko izveidojis Joahims Mesings un līdzstrādnieki. Sākotnējais darbs pie šīs plazmīdu sērijas tika veikts Kalifornijas Universitātē. Tā ir apļveida divpavedienu DNS.
2. attēls: pUC19
Šis plazmīdu vektors satur arī svarīgas funkcijas. Tam ir β-glaktosidāzes (lacz) gēna N-gala fragments. Tam ir arī vairāku klonēšanas vietu (MCS) reģions. Šis reģions ir sadalīts lacz gēna 6. un 7. kodonos. MCS reģions nodrošina daudzas restrikcijas endonukleāzes restrikcijas vietas. Papildus β-glaktosidāzes gēnam pUC19 kodē arī ampicilīna rezistences gēnu (AmpR). Turklāt replikācijas izcelsme ir iegūta no plazmīdas pMB1. Lai gan pUC19 ir maza izmēra, tam ir liels kopiju skaits (500–700 kopijas uz vienu baktēriju šūnu). Šī plazmīda vektora molekulmasa ir 1,75 × 106 d altoni.
Kādas ir līdzības starp pBR322 un pUC19?
- pBR322 un pUC19 ir divu veidu plazmīdu vektori.
- Tie ir populāri coli klonēšanas vektori.
- Abiem plazmīdu vektoriem ir viena un tā pati plazmīdas pMB1 replikācijas forma.
- Šiem vektoriem ir vairākas ierobežošanas vietas.
- Abos plazmīdu vektoros kā atlasāms marķieris ir ampicilīna rezistences gēns.
Kāda ir atšķirība starp pBR322 un pUC19?
pBR322 ir plazmīdu vektors, kura garums ir 4361 bāzes pāri, savukārt pUC19 ir plazmīdu vektors, kura garums ir 2686 bāzes pāri. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp pBR322 un pUC19. Turklāt pBR322 ir zema kopiju skaita plazmīdu vektors, savukārt pUC19 ir liela kopiju skaita plazmīda vektors.
Tālāk esošajā infografikā tabulas veidā ir parādītas atšķirības starp pBR322 un pUC19, lai veiktu salīdzināšanu.
Kopsavilkums - pBR322 pret pUC19
Visbiežāk izmantotie E.coli klonēšanas vektori ir ģenētiski modificētas plazmīdas.pBR322 un pUC19 ir divu veidu plazmīdu vektori. pBR322 ir plazmīdas vektors, kura garums ir 4361 bāzes pāri, savukārt pUC19 ir plazmīdas vektors, kura garums ir 2686 bāzes pāri. Tātad šī ir galvenā atšķirība starp pBR322 un pUC19.
