Galvenā atšķirība starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu ir tāda, ka kopējais šūnu skaits nosaka visas šūnas, tostarp dzīvās un mirušās mikrobu šūnas paraugā, savukārt dzīvotspējīgo šūnu skaits nosaka tikai dzīvo mikrobu šūnas paraugā.
Organismu skaita skaitīšana populācijā tiek uzskatīta par nepieciešamu lielākajā daļā eksperimentālo darbu. Tāpēc mēs cenšamies analizēt mikrobu skaitu paraugā, izmantojot tiešas un netiešas metodes. Tiešie mērījumi ietver metodes, kas tieši uzskaita šūnu skaitu. Netiešie mērījumi ietver dažu parametru mērīšanu, ko var saistīt ar šūnu skaitu, piemēram, šūnu blīvumu, sauso svaru utt. Dažas metodes kvantitatīvi nosaka tikai dzīvās mikrobu šūnas paraugā. Dzīvotspējīgo šūnu skaits ir viena no šādām metodēm. Tiešā mikroskopiskā uzskaite nosaka visu šūnu daudzumu zināmā barotnes/parauga tilpumā, izmantojot mikroskopu. Tāpēc tiek skaitītas gan dzīvās, gan mirušās šūnas. Tas ir kopējā šūnu skaita veids.
Kas ir kopējais šūnu skaits?
Kopējais šūnu skaits ir metode, kas ietver visu šūnu skaitīšanu zināmā barotnes/parauga tilpumā, izmantojot mikroskopu un skaitīšanas kameru (hemocitometru). Atšķirībā no dzīvotspējīgo šūnu skaita, tiek skaitītas gan dzīvās, gan mirušās šūnas. Tāpēc šis ir kopējais skaits, ja vien novērošanas laikā netiek uzklāts dzīvotspējas traips. Mikroskopijā šūnas tiek novērotas tieši zem mikroskopa un skaitītas. Tas izmanto šūnu suspensiju, kas sastāv no mikrobu šūnām. Lai atvieglotu skaitīšanu un precīzus mērījumus, paraugu var atšķaidīt. Ļoti augstā/zemā šūnu koncentrācijā kopējā šūnu skaita iegūšana, izmantojot mikroskopu, ir grūts uzdevums.
Attēls 01: skaitīšanas kamera - hemocitometrs
Skaitīšanas kameras ir vienkāršas, lētas un ātras, lai noteiktu kopējo šūnu skaitu. Vissvarīgākais ir tas, ka skaitīšanas kameras ir noderīgas gan eikariotu, gan prokariotu skaitīšanai. Mēs saskaitām šūnas atlasītajos zināma tilpuma kvadrātos, lai noteiktu kopējo šūnu skaitu.
Kas ir dzīvotspējīgo šūnu skaits?
Dzīvotspējīgo šūnu skaits ir dzīvu mikrobu šūnu skaitīšanas metode paraugā. Tas saskaita tikai dzīvās šūnas paraugā. Dzīvotspējīgo šūnu skaits, membrānas filtrēšana un visticamākais skaits ir dažas dzīvotspējīgas šūnu skaitīšanas metodes. Šīs pieejas ir balstītas uz izaugsmi. Dzīvotspējīgo platību skaitīšanas metode ir spēcīga metode, ko izmanto daudzās mikrobioloģiskās jomās, tostarp pārtikas un piena mikrobioloģijā, medicīniskajā mikrobioloģijā, vides mikrobioloģijā, mikrobu ģenētikā, augšanas barotņu izstrādē un biotehnoloģijā.
Visizplatītākais dzīvotspējīgo baktēriju skaitīšanas veids ir agara barotnē izmantot paraugu, kas spēj veidot kolonijas. Ir divi galvenie veidi, kā veikt šķīvju skaitīšanu: šķīvju izkliedēšanas tehnika un šķīvju uzliešanas tehnika. Zināmu parauga tilpumu var vai nu uzklāt uz agara plāksnes virsmas, vai arī sajaukt agarā. Pēc tam plāksni inkubē un saskaita radušās kolonijas. Koloniju skaits ir saistīts ar mikroorganismu skaitu sākotnējā paraugā. Dzīvotspējīgo šūnu skaits mēra tikai tās šūnas, kas ir dzīvas un aug.
2. attēls: dzīvotspējīgu plākšņu skaits
Visticamākais skaitlis (MPN) ir alternatīva plākšņu skaitīšanas metodēm dzīvotspējīgo šūnu populācijas blīvuma novērtēšanai. Tā uzskaita organismus, kas aug šķidrā kultūrā, un tādējādi ir galvenokārt bakterioloģisks paņēmiens. Tas ir īpaši noderīgi zemām organismu koncentrācijām, piemēram, piens, dzeramais ūdens.
Membrānas filtrēšanas tehnika ir piemērotāka gadījumos, kad mikrobi ir ļoti atšķaidīti, piemēram, pilsētas ūdensapgādē. To veic, vienkārši izlaižot zināmu šķidruma tilpumu caur filtru un inkubējot to uzturvielu barotnē. Tiek saskaitītas kolonijas, kas veidojas uz filtra, un tiek aprēķināts baktēriju daudzums vienā mililitrā parauga.
Kādas ir līdzības starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu?
- Kopējais šūnu skaits un dzīvotspējīgo šūnu skaits ir divu veidu mikrobu metodes, kas nosaka šūnu skaitu.
- Tās ir mikrobioloģijas laboratorijās plaši izmantotas uzskaitīšanas metodes.
Kāda ir atšķirība starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu?
Kopējais šūnu skaits uzskaita visas dzīvās un mirušās mikrobu šūnas paraugā. Turpretim dzīvotspējīgo šūnu skaits uzskaita tikai dzīvās šūnas paraugā. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu. Kopējais šūnu skaits nav atkarīgs no koloniju augšanas agara plāksnēs, savukārt dzīvotspējīgo šūnu skaits ir uz augšanu balstīts paņēmiens, un tas ir atkarīgs no mikrobu koloniju augšanas agara plāksnēs.
Tālāk esošajā informācijas grafikā ir apkopota atšķirība starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu.
Kopsavilkums - kopējais šūnu skaits salīdzinājumā ar dzīvotspējīgo šūnu skaitu
Kopējais šūnu skaits uzskaita gan dzīvās, gan mirušās mikrobu šūnas, savukārt dzīvotspējīgo šūnu skaits uzskaita tikai dzīvās šūnas. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp kopējo šūnu skaitu un dzīvotspējīgo šūnu skaitu. Arī dzīvotspējīgo šūnu skaits ir uz augšanu balstīts paņēmiens, atšķirībā no kopējā šūnu skaita. Turklāt tam ir nepieciešama plākšņu inkubācija, līdz tiek iegūtas redzamās kolonijas. Dzīvotspējīgo šūnu skaits, MPN un membrānas filtrēšana ir dažas dzīvotspējīgo šūnu skaita noteikšanas metodes, savukārt tiešā mikroskopija un hemocitometra izmantošana ir divas kopējā šūnu skaita noteikšanas metodes.
