Galvenā atšķirība starp nosacīto un konstitutīvo nokautu ir tāda, ka nosacīts nokauts ir interesējošā gēna dzēšana no konkrēta audu vai orgāna, savukārt konstitutīvais nokauts ir interesējošā gēna neatgriezeniska dzēšana no dzīvnieka.
Pele ir labs analogs lielākajai daļai cilvēka bioloģisko procesu, jo tām ir aptuveni 99% līdzīgu gēnu. Nokautās peles ir noderīgi eksperimentālie dzīvnieki, un tās izmanto pētījumos, lai pētītu dažādus vēža veidus un cilvēku slimības, piemēram, aptaukošanos, sirds slimības, diabētu, artrītu, vielu lietošanu, trauksmi, novecošanos un Parkinsona slimību utt. Knockout peles ir ģenētiski modificēti organismi, kuriem ir funkcionāli inaktivēts interesējošais gēns. Gēnu var izsist, to aizstājot vai ievietojot mākslīgu DNS gabalu, lai to inaktivētu. Nokautas peles sniedz vērtīgu informāciju par gēnu funkcijām. Ir divi izslēgšanas modeļi kā konstitutīvs (parastais) un nosacījums. Konstitutīvā modelī mērķa gēns visu laiku ir pastāvīgi inaktivēts visā dzīvniekā. Nosacītā modelī gēnu ekspresijas inducējama inaktivācija notiek audiem specifiskā vai īslaicīgā veidā.
Kas ir nosacīts nokauts?
Nosacīts nokauts ir modelis, kurā interesējošais gēns tiek izdzēsts tikai no konkrēta audu vai orgāna. Šis modelis ietver savlaicīgu vai audu specifisku gēna dzēšanu. Salīdzinot ar konstitutīvo nokautu modeli, nosacītā nokaušanas modelis ir uzlabots. Tas dzēš gēnu tikai mērķa orgānā vai audos. Piemēram, nosacītā nokauta modelis tiek izmantots, pētot slimību, kas ietekmē aknas (orgānu). Šeit zinātnieki izslēdz šo konkrēto gēnu no aknām. Nosacīts nokauts novērš parastā nokauta blakusparādības.
01. attēls: nosacīts nokauts
Nosacīta izspiešana atvieglo gēnu izslēgšanu noteiktā attīstības stadijā. Tas arī ļauj mums izpētīt, kā gēna izslēgšana vienā audos ietekmē to pašu gēnu citos audos. Šo modeli bieži izmanto, lai pētītu cilvēku slimības citiem zīdītājiem. Nosacītu nokautu peles modeli var izveidot 6 līdz 9 mēnešu laikā, izmantojot CRISPR gēnu rediģēšanas tehnoloģiju.
Kas ir konstitutīvais nokauts?
Constitutive Knockout modelis (parastais vai visa ķermeņa Knockout) ir modelis, kurā mērķa gēns tiek neatgriezeniski inaktivēts visā dzīvniekā (katrā organisma šūnā). Parasti, lai izveidotu konstitutīvu nokautu peļu modeli, izmantojot CRISPR gēnu rediģēšanas tehnoloģiju, nepieciešami četri līdz seši mēneši. Tomēr laiks mainās atkarībā no modeļa konstruēšanai izmantotās tehnoloģijas.
2. attēls: Izsitošā pele
Salīdzinot ar nosacīto nokautu modeli, konstitutīvais nokauts ir sākotnēji izstrādātais modelis, kam ir blakusparādības. Interesējošais gēns tiek izdzēsts no visiem attīstības posmiem. Tāpēc gēnu ekspresija nenotiek visā dzīvnieka dzīves laikā. Salīdzinot ar konstitutīvo nokautu, nosacījuma nokauts ir drošs, vienkāršāks un vairāk balstīts uz rezultātiem.
Kādas ir līdzības starp nosacīto un konstitutīvo nokautu?
- Nosacīts un konstitutīvs nokauts ir divi izslēgšanas gēnu modeļi.
- Abos modeļos interesējošais gēns ir izslēgts.
- Būvējot abus modeļus, plaši tiek izmantota CRISPR gēnu rediģēšanas tehnoloģija.
Kāda ir atšķirība starp nosacīto un konstitutīvo nokautu?
Nosacītā nokautā interesējošais gēns tiek inaktivēts noteiktā audu tipā vai noteiktā laika punktā. Konstitutīvā nokauta gadījumā interesējošais gēns tiek neatgriezeniski inaktivēts uz visu laiku. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp nosacīto un konstitutīvo nokautu. Nosacītais nokauts ir mērķtiecīgāks nekā konstitutīvs nokauts. Turklāt nosacījuma nokauts ir drošs un vairāk uz rezultātu orientēts nekā konstitutīvais nokauts.
Zemāk informācijas grafikā tabulas veidā ir norādītas vairāk atšķirību starp nosacīto un konstitutīvo nokautu.
Kopsavilkums - nosacījums pret konstitutīvo nokautu
Nokautas peles ir noderīgas gēnu funkciju pētīšanai in vivo. Tie sniedz ieskatu gēnu fizioloģiskajā lomā cilvēkiem. Tādējādi tie ir vērtīgs instruments ģenētiķiem, lai izstrādātu terapiju ģenētisko slimību ārstēšanai. Nosacītās un konstitutīvās nokaušanas peles ir divi modeļi. Nosacītā nokaušanas gadījumā interesējošais gēns tiek inaktivēts noteiktā audu tipā vai noteiktā laika punktā. Konstitutīvā nokauta gadījumā interesējošais gēns visu laiku tiek neatgriezeniski inaktivēts visu veidu audos. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp nosacīto un konstitutīvo nokautu. Nosacītais nokauts ir mērķtiecīgāks, drošāks, vieglāks un vairāk uz rezultātiem orientēts salīdzinājumā ar konstitutīvo nokautu.
