Galvenā atšķirība - RNASE A vs RNASE H
Ribonukleāzes ir nukleāzes, kas specifiski sadala RNS mazākās vienībās. Tos var iedalīt divās kategorijās; endoribonukleāzes un eksoribonukleāzes. Endoribonukleāze ir endonukleāze, kas var noārdīt vienpavedienu vai divpavedienu RNS. Tas sašķeļ fosfodiestera saites RNS polinukleotīdu ķēdē. Piemēri ir RNāze A, RNāze III, RNāze T1, RNāze P un RNāze H. Eksoribonukleāze ir eksonukleāze, kas degradēja RNS, noņemot terminālos nukleotīdus no RNS molekulas 5. vai 3. gala. Piemēri ir RNāze R, RNāze II, RNāze D un RNāze PH.galvenā atšķirība starp RNASE A un RNASE H ir tāda, ka RNāze A ir aizkuņģa dziedzera ribonukleāze, kas specifiski sadala vienpavedienu RNS mazākos komponentos, savukārt RNāze H ir nespecifisks enzīms, kas sadala RNS RNS-DNS hibrīdā mazākās vienībās. hidrolītiskais mehānisms.
Kas ir RNASE A?
RNāze A ir aizkuņģa dziedzera ribonukleāze, kas specifiski šķeļ nesapārotos citozīna un uracila atlikumus vienpavedienu RNS 3' galā. RNāze H darbojas ar lielāku sāls koncentrāciju (0,3 M vai augstāka NaCl koncentrācija). Hidrolītiskā reakcija sastāv no diviem posmiem. Tas veido 3’ fosforilētu produktu, izmantojot 2’, 3’ ciklisko monofosfāta starpproduktu. Lai gan tas ir raksturīgs vienpavedienu RNS augstākai sāls koncentrācijai, tā var arī noārdīt divpavedienu RNS un RNS RNS-DNS hibrīdā zemākā NaCl koncentrācijā (mazākā par 0,3 M NaCl).
Brūss Merifīlds pirmo reizi sintezēja šo fermentu. RNāze A ir ļoti populārs enzīms molekulārajos pētījumos. Liellopu aizkuņģa dziedzera RNāze A ir RNāzes A piemērs. Un tas ir viens no izturīgākajiem enzīmiem, ko izmanto laboratorijā. Šim fermentam tā darbībai nav nepieciešams kofaktors. Tas ir ļoti termostabils enzīms. RNāze A ir pirmais enzīms un trešais proteīns, kuram tika noteikta pareiza aminoskābju secība. Šis enzīms ir ļoti mazs ar 124 aminoskābēm un 12600 da molekulmasu. Un tajā ir četri histidīna atlikumi (His 12 un His 119, kas ir iesaistīti katalītiskā reakcijā).
Attēls 01: RNāze A
RNāzi A var izolēt, vārot neapstrādātu paraugu. Vārot visi pārējie enzīmi noārda atlikušo RNāzi A. RNāze A ir pārsteidzoši stabils enzīms. Šis enzīms inhibē ar ribonukleāzes inhibitoru proteīnu, smago metālu un uridīna vanadāta kompleksiem.
Kas ir RNase H?
RNāze H ir nespecifisks ribonukleāzes enzīms, kas var noārdīt RNS RNS-DNS hibrīdā, izmantojot hidrolītisko reakciju. RNāze H sašķeļ RNS 3'-O-P saiti RNS-DNS hibrīdā. Galu galā tas ražo produktus ar 3'OH un 5' fosfātu. DNS replikācijā tai ir galvenā loma, noņemot RNS primeru pēc jaunu DNS pavedienu veidošanās. Laboratorijas apstākļos tas īpaši noārda RNS RNS-DNS hibrīdā, bet ne DNS un nehibridizētā RNS. Un šo fermentu parasti izmanto, lai iznīcinātu RNS šablonu pēc tam, kad cDNS sintēzes laikā ir izveidojusies pirmā komplementārā DNS virkne.
2. attēls: RNase H
RNāze H tiek izmantota arī nukleāzes aizsardzības testos. To var iekļaut arī poli A astes noņemšanai no mRNS. RNāze H spēj iznīcināt nekodējošu RNS šūnas iekšpusē un ārpusē. Metālu joni ir nepieciešami kā šīs olb altumvielu aktivitātes kofaktori. Helātu veidotāju (EDTA) var izmantot, lai inhibētu RNāzes H enzīmu.
Kādas ir līdzības starp RNASE A un RNASE H?
- Abām ir olb altumvielu daba.
- Abas ir endoribonukleāze
- Abi var noārdīt RNS.
- Abi veic hidrolītiskas reakcijas.
- Molekulārās laboratorijas izmanto abas šīs.
Kāda ir atšķirība starp RNASE A un RNASE H?
RNASE A pret RNASE H |
|
| RNāze A ir aizkuņģa dziedzera ribonukleāze, kas pie lielākas sāls koncentrācijas īpaši šķeļ vienpavedienu RNS nepāra citozīna un uracila atlikumu 3' galu. | RNāze H ir nespecifisks ribonukleāzes enzīms, kas var noārdīt RNS RNS-DNS hibrīdā, izmantojot hidrolītisko reakciju. |
| RNS šķelšanās raksturs | |
| RNāze A īpaši šķeļ vienpavedienu RNS pie lielākas sāls koncentrācijas. | RNāze H šķeļ RNS RNS-DNS hibrīdā. |
| Vajadzība pēc līdzfaktoriem aktivitātei | |
| RNāzes A darbībai nav nepieciešami kofaktori. | RNāzes H darbībai ir nepieciešami metālu joni kā kofaktori. |
| Olb altumvielu aktivitātes inhibitori | |
| Ribonukleāzes inhibitoru proteīns, smago metālu un uridīna vanadāta kompleksi inhibē RNSāzes A aktivitāti. | Helators (EDTA) inhibē RNāzes H aktivitāti. |
| RNS primera noņemšana DNS replikācijā | |
| RNāze A netiek izmantota RNS primera noņemšanai DNS replikācijā. | RNāze H tiek izmantota RNS primera noņemšanai DNS replikācijā |
| DNS veidņu noņemšana komplementārās DNS (C-DNS) sintēzē | |
| RNāze A netiek izmantota RNS veidņu noņemšanai komplementārās DNS (C-DNS) sintēzes laikā. | RNāze H tiek izmantota RNS šablona noņemšanai komplementārās DNS (C-DNS) sintēzes laikā. |
| Poli-A-astes noņemšana mRNS, kas hibridizēta uz Oligo (dt) | |
| RNāze A netiek izmantota, lai noņemtu “poli-A asti” mRNS, kas hibridizēta ar oligo (dt). | RNāze H tiek izmantota, lai noņemtu “poli-A asti” mRNS, kas hibridizēta ar oligo (dt) |
Kopsavilkums - RNASE A pret RNASE H
Ribonukleāzes ir nukleāzes enzīmi, kas spēj šķelt RNS mazākās vienībās. Tie ir divu veidu; endoribonukleāzes un eksoribonukleāzes. Endoribonukleāze ir endonukleāze, kurai ir spēja noārdīt vienpavedienu vai divpavedienu RNS. Un tas sašķeļ fosfodiestera saiti RNS polinukleotīdu ķēdē. RNāze A un RNāze H ir divas endoribonukleāzes. RNāze A ir aizkuņģa dziedzera ribonukleāze, kas īpaši šķeļ nesapārotus citozīna un uracila atlikumus vienpavedienu RNS 3' galā pie lielākas sāls koncentrācijas. RNāze H ir nespecifisks ribonukleāzes enzīms, kas var noārdīt RNS RNS-DNS hibrīdā, izmantojot hidrolītisko reakciju. Šī ir atšķirība starp RNāzi A un RNāzi H.
Lejupielādēt PDF failu RNASE A vs RNASE H
Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistē saskaņā ar atsauces piezīmi. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit Atšķirība starp RNASE A un RNASE H
