Galvenā atšķirība - in situ hibridizācija pret imūnhistoķīmiju
Vēža un infekcijas slimību diagnostika ir populāra tendence, kurā tiek izmantotas jaunas proteomikas un genomikas metodes, lai identificētu audzējus vai infekciozās šūnas, to proliferāciju un šūnu attīstības vietas, kā arī analizētu ģenētisko bāzi visvairāk inficējamām un infekcijas slimībām. neinfekcijas slimības. Tas nodrošinās precīzu zāļu apstrādi un izstrādi, kā arī slimību ārstēšanai pielāgotu terapiju izstrādi. In situ hibridizācija (ISH) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas šādas plaši izmantotas metodes vēža bioloģijā, un galvenā atšķirība starp in situ hibridizāciju un imūnķīmiju ir molekulās, kuras tiek izmantotas analīzes procedūrā. ISH analīzēs izmanto nukleīnskābju zondes, savukārt IHC diagnostiskai noteikšanai izmanto monoklonālās un poliklonālās antivielas.
Kas ir in situ hibridizācija (ISH)?
In situ hibridizācija ir nukleīnskābju hibridizācijas paņēmiens, ko tieši veic kādai audu daļai vai daļai, visos audos vai šūnās. Metode ir atkarīga no Vatsona Krika komplementāro bāzu savienošanas teorijas, kā rezultātā tiek iegūti DNS-DNS hibrīdi vai DNS-RNS hibrīdi, kas var noteikt mutācijas gēnus vai identificēt vajadzīgo interesējošo gēnu. Hibridizācijas tehnikas laikā kā zondes tiek izmantotas vienpavedienu DNS sekvences, divpavedienu DNS sekvences, vienpavedienu RNS sekvences vai sintētisko oligonukleotīdu sekvences, un šīs zondes tiek marķētas ar radioaktīvo fosforu tā 5' galā identifikācijas procedūrām pēc autoradiogrāfijas vai marķē ar fluorescējošām krāsvielām.. Ir pieejami dažādi ISH metožu veidi atkarībā no izmantotās zondes veida un izmantotās vizualizācijas metodes.
Attēls 01: Fluorescējoša in situ hibridizācija
ISH ir daudz pielietojumu, galvenokārt infekcijas slimību molekulārajā diagnostikā, lai identificētu patogēnu klātbūtni un apstiprinātu patogēnu ar molekulārās diagnostikas palīdzību. To izmanto arī attīstības bioloģijas, kariotipizēšanas un filoģenētiskās analīzes un hromosomu fiziskās kartēšanas jomās.
Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?
IHC tehnikā galvenā analizētā molekula ir antigēns. IHC laikā tiek izmantotas monoklonālās un poliklonālās antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni pēc infekcijas vai ļaundabīgo šūnu proliferācijas statusa. Metode ir balstīta uz antigēna-antivielu saistīšanu, un šai tehnikai tiek izmantotas enzīmu etiķetes; viens no šādiem lietojumiem ir ELISA (enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests). Marķieri var būt arī fluorescējošas antivielas vai radioaktīvi iezīmētas antivielas.
2. attēls: imūnhistoķīmija
IHC plaši izmanto vēža šūnu noteikšanai. Diagnostikas procedūras ir vērstas uz audzēja šūnās esošajiem antigēniem, lai identificētu un raksturotu audzēju. Tāda pati procedūra ir iekļauta infekcijas izraisītāju diagnosticēšanai. Monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas arī dažādu gēnu produktu analīzei, nodrošinot antivielu un antigēnu saistīšanās reakciju starp vēlamo proteīnu un ievadīto sintētisko antivielu.
Kādas ir līdzības starp in situ hibridizāciju un imūnhistoķīmiju?
- ISH un IHC ir ļoti specifiskas reakcijas.
- Abas metodes ir ļoti precīzas.
- Abas metodes var izmantot vēža un infekcijas slimību diagnostikā.
- Šīs metodes tiek veiktas sterilā in vitro vidē.
- Abas ir ātras metodes, kas nodrošina reproducējamus rezultātus.
- ISH un IHC izmanto tādas noteikšanas metodes kā radio marķēšana un fluorescences metodes.
Kāda ir atšķirība starp in situ hibridizāciju un imūnhistoķīmiju?
In situ hibridizācija pret imūnhistoķīmiju |
|
| ISH ir nukleīnskābju hibridizācijas paņēmiens, ko tieši veic kādai audu daļai vai daļai vai visam audam. | IHC ir metode, kurā tiek izmantotas monoklonālās un poliklonālās antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni, kas ir īpaši proteīnu marķieri, kas novietoti uz šūnu virsmām. |
| Analizēto biomolekulu veids | |
| ISH analizē nukleīnskābes. | IHC analizē olb altumvielas-antigēnus. |
| Bioķīmiskās reakcijas pamati | |
| Šajā tehnikā notiek komplementāra bāzes savienošana pārī starp DNS-DNS vai DNS-RNS. | Antigēnu un antivielu mijiedarbība ir saistīta ar imūnhistoķīmiju. |
| Ar enzīmiem saistītas noteikšanas metodes | |
| ISH nevar izmantot ar enzīmiem saistītās noteikšanas metodes. | IHC var izmantot ar enzīmiem saistītās noteikšanas metodes. |
Kopsavilkums - in situ hibridizācija pret imūnhistoķīmiju
Molekulārā diagnostika ir ātras un apstiprinošas metodes, ko var izmantot, lai identificētu neinfekcijas slimību, piemēram, vēzi vai infekcijas slimību, piemēram, HIV vai tuberkulozi, pamatojoties uz šūnās esošajiem molekulārajiem marķieriem, kas izraisa slimības izpausmi.. Molekulārie marķieri var būt izteiktu proteīnu veidā vai ģenētiskā līmenī, pamatojoties uz kuriem tiek ieviestas dažādas jaunas metodes, lai palielinātu efektivitāti un ir mazāk darbietilpīgas, lai gan ar šīm metodēm ir saistītas augstas izmaksas. Tādējādi ISH ir atkarīgs no DNS-DNS vai DNS-RNS hibrīda veidošanās, un IHC ir atkarīgs no specifiskajām reakcijām starp antivielu un antigēnu. Šī ir atšķirība starp in situ hibridizāciju.
Lejupielādēt PDF versiju in situ hibridizācijai pret imūnhistoķīmiju
Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistē saskaņā ar atsauces piezīmi. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp in situ hibridizāciju un imūnhistoķīmiju.
