Galvenā atšķirība - imūncitoķīmija pret imūnhistoķīmiju
Imūncitoķīmija (ICC) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas plaši izmantotas metodes molekulārajā diagnostikā, kas identificē un apstiprina gan neinfekcijas, gan infekcijas slimību rašanos, pamatojoties uz šūnās esošajiem molekulārajiem marķieriem. Galvenā atšķirība imūncitoķīmijā un imūnhistoķīmijā ir molekula, ko šajās tehnikās izmanto kā analīzes procedūru. ICC izmanto primārās un sekundārās antivielas, kas konjugētas ar marķieriem, piemēram, fluorescenci, savukārt IHC, monoklonālās un poliklonālās antivielas izmanto diagnostikas noteikšanai.
Kas ir imūncitoķīmija (ICC)?
ICC izmanto primārās un sekundārās antivielas, kas saistītas ar marķieriem, piemēram, fluorescējošiem marķieriem vai fermentiem, un tā ir spēcīga noteikšanas metode, lai noteiktu mērķa šūnās esošos antigēnus, kas var būt infekciozas šūnu daļiņas vai vēža audzēja šūnas. Imūncitoķīmijai ir nepieciešamas trīs veidu kontroles.
- Primārā antiviela - kontrole, kas parāda primārās antivielas specifiskumu, kas saistās ar antigēnu
- Sekundārā antiviela - kontrole, kas parāda, ka marķējums ir specifisks primārajai antivielai
- Etiķetes vadīklas - parādiet, ka marķējums ir pievienotās etiķetes rezultāts, nevis endogēnas marķējuma rezultāts.
01. attēls. Imūncitoķīmija iezīmē atsevišķus proteīnus šūnās (šeit tirozīna hidroksilāze simpātisko autonomo neironu aksonos ir parādīta zaļā krāsā).
Primārā antivielu kontrole ir specifiska katrai jaunai antivielai, un to nevar atkārtot katrā eksperimentā. Sekundārā antivielu kontrole ir izstrādāta, pamatojoties uz eksperimentā izmantoto primāro antivielu, un tā ir iekļauta katrā eksperimentā. Marķēšanas kontrole tiek iekļauta, ja tiek mainīts procedūras nosacījums, tiek mainīts paraugs vai tiek atrasts neparedzēts marķējums.
Divi galvenie ICC pielietojumi ir radioimūno tests (RIA) un ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA). Visbiežāk izmantotā antiviela ir imūnglobulīns G.
Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?
Imūnhistoķīmijā avota paraugs satur monoklonālas un poliklonālas antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni svešās šūnās. Šīs metodes pamatā ir specifiska antigēna un antivielu saistīšanās reakcija. Noteikšanā izmantotās antivielas var marķēt ar dažādiem marķieriem; tie var būt fluorescences marķieri, radioaktīvi iezīmēti marķieri vai ķīmiskie marķieri. Veicinot antigēna un mērķa antivielas saistīšanos in vitro, var noteikt konkrēta šūnas proteīna esamību vai neesamību.
Attēls 02: normālas nieres imūnhistoķīmiskā krāsošana ar CD10
Pašlaik zinātnieki ir iesaistīti mērķa antivielu izstrādē specifiskiem antigēniem, kas atrodas šūnās un var attīstīties kā ļaundabīgas audzēja šūnas vai antigēni, kas atrodas infekcijas izraisītājos, piemēram, HIV.
Kādas ir līdzības starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju?
- Reakcijas ir ļoti specifiskas un precīzas ICC un IHC.
- ICC un IHC pielietojums ietver vēža un infekcijas slimību diagnostiku.
- Abos apstākļos ir jāuztur sterili apstākļi, un tie jāveic in vitro
- Abas metodes nodrošina reproducējamus rezultātus.
- Abi ir strauji.
- Radio marķēšana, fluorescences metodes tiek izmantotas kā noteikšanas metodes gan ICC, gan IHC.
- Abu pamatā ir antigēna un antivielu savienošana pārī.
Kāda ir atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju?
Imunocitoķīmija (ICC) pret imūnhistoķīmiju (IHC) |
|
| ICC izmanto primārās un sekundārās antivielām piesaistītos marķierus, piemēram, fluorescējošos marķierus vai fermentus, un tā ir spēcīga noteikšanas metode mērķa šūnās esošo antigēnu noteikšanai. | IHC ir metode, kas izmanto monoklonālas un poliklonālas antivielas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni, kas ir īpaši proteīnu marķieri, kas novietoti uz šūnu virsmām. |
| Parauga avots | |
| Paraugi, kas iegūti no audiem, kas histoloģiski apstrādāti plānās daļās, tiek izmantoti ICC. | IHC izmanto paraugus, kas sastāv no šūnām, kas audzētas monoslānī, vai šūnām suspensijā, kuras tiek uzklātas uz priekšmetstikliņa. |
| Paraugu apstrāde | |
| ICC šūnām jābūt caurlaidīgām, lai atvieglotu antivielu iekļūšanu intracelulārajos mērķos. | IHC šūnas pirms krāsošanas tiek fiksētas ar formalīnu, iestrādātas parafīnā. |
Kopsavilkums - imūncitoķīmija pret imūnhistoķīmiju
Molekulārā diagnostika tiek izmantota, lai identificētu un apstiprinātu neinfekcijas slimību un infekcijas slimību rašanos, pamatojoties uz šūnās esošajiem molekulārajiem marķieriem. Molekulārie marķieri var būt proteīni vai DNS vai RNS sekvences; tādu tehnoloģiju kā ICC un IHC attīstība ir pavērusi ceļu zinātniekiem agrīnā stadijā identificēt slimību un tās cēloni. Gan ICC, gan IHC ir atkarīgi no specifiskajām reakcijām starp antivielu un antigēnu, lai gan parauga avots. Galvenā atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju ir abu procedūru paraugu apstrāde.
Lejupielādēt PDF versiju Imūncitoķīmija vs imūnhistoķīmija
Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistē saskaņā ar atsauces piezīmi. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit Atšķirība starp imūncitoķīmiju un imūnhistoķīmiju.
