Galvenā atšķirība starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu ir tāda, ka kolorimetriskā pārbaude nosaka krāsaino savienojumu koncentrāciju šķīdumā, bet fluorometriskā pārbaude nosaka šķīduma kinētisko mehānismu.
Bioķīmiskais tests ir metode, kas analītiski nosaka vai kvantitatīvi nosaka bioloģiskās molekulas vai vielas aktivitāti. Tas ir in vitro process. Kolorimetriskā pārbaude un fluorometriskā pārbaude ir divu veidu parastie bioķīmiskie testi, ko veic laboratorijās. Vairākas metodes, piemēram, ELISA un Western blotēšana, ir arī sarežģīti bioķīmiski testi vielmaiņas aktivitātes kvantitatīvai noteikšanai un biomolekulu, piemēram, olb altumvielu, fermentu un citu mazu molekulu funkcionālās uzvedības mērīšanai. Šos testu veidus izmanto proteīna-DNS, proteīna-RNS un proteīna-olb altumvielu mijiedarbības identificēšanai.
Kas ir kolorimetriskā pārbaude?
Kolimetriskā pārbaude ir metode, kas nosaka krāsaino savienojumu koncentrāciju šķīdumā. Citiem vārdiem sakot, kolorimetriskā pārbaude ir reakcija, kas izraisa krāsas izmaiņas fermentatīvas vai ķīmiskas reakcijas dēļ starp reaģentiem un analītiem. Kolorimetriskās analīzes tiek praktizētas bioķīmijā, lai pārbaudītu fermentus, specifiskus savienojumus, hormonus, antivielas un citus analītus. Viņi izmanto kolorimetrus vai spektrofotometrus. Kolorimetri ir instrumenti, kas raksturo krāsainus paraugus, lai nodrošinātu objektīvu krāsu raksturlielumu mērījumu. Spektrofotometrs ir ierīce, kas mēra gaismas intensitāti atkarībā no gaismas krāsas vai viļņa garuma.
Attēls 01: Kolorimetriskā pārbaude
Kā darbojas kolorimetriskā pārbaude?
Kolimetriskā testā tiek sagatavota plāksne ar noteiktu antivielu, kas piesaistīta iedobēm. Tad pievieno paraugu. Tas var ļaut paraugam saistīties ar antivielu. Pēc tam iedobēm pievieno noteikšanas antivielu un substrātu, lai reaģētu ar noteikšanas zondi. Stop šķīdumu pievieno beigās pirms nolasīšanas. Tukšu iedobi, ko sauc par tukšo, atstāj bez parauga. Kolorimetriskajā testā, jo tumšāka krāsa, jo lielāka ir analizējamās vielas koncentrācija. Parasti, lai nolasītu, ir nepieciešams tikai viens viļņa garums. Bet, ja ir atsauces mērījums, tiek izmantoti divi vai vairāki viļņu garumi.
Kas ir fluorometriskā pārbaude?
Fluorometriskā pārbaude ir metode, kas nosaka enzīmu reakciju kinētisko mehānismu. Fluorometriskā pārbaude notiek, veidojot fluorescējošu produktu no nefluorescējoša substrāta vai otrādi. Šajā testā tiek izmantota arī fluorescences rezonanses enerģijas pārnese (FRET), kur fermentatīvā reakcija maina divu fluoroforu stāvokli substrātā, tādējādi mainot fluorescences intensitāti.
2. attēls: Fluorometriskā pārbaude
Fluorometriskie testi parasti ir daudz jutīgāki nekā citi testi. Diagnostikas enzīmu aprēķini pacientu audu, šūnu vai šķidruma paraugos palielinās, jo tie ir jutīgāki.
Kā darbojas fluorometriskais tests?
Fluorometriskajā testā paraugam plāksnē pievieno substrātu un fluorescences reakciju nosaka, izmantojot plates lasītāju. Šeit katra šūna tiek mērīta atsevišķi. Fluorometriskajos testos tiek izmantotas necaurspīdīgas plāksnes. Tas samazina gaismas izkliedi. Šim testa veidam ir nepieciešami divi viļņu garumi. Viens viļņa garums ir paredzēts ierosmes noteikšanai, bet otrs viļņa garums ir paredzēts emisijai.
Kādas ir līdzības starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu?
- Kolimetriskā pārbaude un fluorometriskā pārbaude ir divu veidu bioķīmiski testi.
- Abas pārbaudes tiek veiktas medicīniskai diagnostikai.
- Šajos testos notiek fermentatīvā reakcija.
- Abos testos tiek izmantots substrāts un analīti.
Kāda ir atšķirība starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu?
Kolimetriskā pārbaude ir metode, kas nosaka krāsaino savienojumu koncentrāciju šķīdumā, savukārt fluorometriskā pārbaude ir metode, kas nosaka enzīmu reakciju kinētisko mehānismu. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu. Turklāt fluorometriskie testi ir jutīgāki nekā kolorimetriskie testi; tādējādi fluorometriskie testi spēj noteikt vairāk analītu. Tādējādi šī ir vēl viena svarīga atšķirība starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu. Turklāt fluorometriskām pārbaudēm ir nepieciešami divi viļņa garumi, savukārt kolorimetriskās pārbaudes veic ar vienu viļņa garumu.
Tālāk esošajā infografikā ir parādītas vairāk atšķirību starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu.
Kopsavilkums - kolorimetriskā pret fluorometrisko testu
Bioķīmiskais tests ir analītisks process, ko izmanto, lai noteiktu un kvantitatīvi noteiktu šūnu vielmaiņas reakcijas. Kolorimetriskā pārbaude un fluorometriskā pārbaude ir divu veidu bioķīmiski testi. Kolorimetriskā pārbaude ir reakcija, kas izraisa krāsas izmaiņas fermentatīvas vai ķīmiskas reakcijas dēļ starp reaģentiem un analītiem, savukārt fluorometriskā pārbaude ir metode, ko izmanto, lai noteiktu fermentu reakciju kinētisko mehānismu. Abi testi ir atkarīgi no fermentatīvās reakcijas, kas ietver substrātu un analītu. Fluorometriskie testi ir jutīgāki nekā kolorimetriskie testi. Vissvarīgākais ir tas, ka fluorometriskām pārbaudēm ir nepieciešami divi viļņu garumi, savukārt kolorimetriskos testus var veikt tikai ar vienu viļņa garumu. Tādējādi šeit ir apkopota atšķirība starp kolorimetrisko un fluorometrisko testu.
