Galvenā atšķirība starp Elisa un Western blot ir tā, ka Elisa jeb ar enzīmu saistīta imūntests ir diagnostikas rīks, kas nosaka, vai pacients ir bijis pakļauts noteikta veida vīrusam vai citam infekcijas izraisītājam, savukārt Western blot ir metode, nosaka konkrētu proteīnu no proteīna parauga.
AIDS ir kļuvusi par globālu problēmu, un šīs nāvējošās slimības sastopamība pēdējo desmitgažu laikā ir satraucoši palielinājusies. HIV testi nosaka cilvēka imūndeficīta vīrusa (HIV) klātbūtni, kas izraisa šo sindromu. No dažādiem HIV testiem mūsdienās ļoti populāri ir ELISA un Western Blot. ELISA apzīmē ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu, kas ir uz plāksnēm balstīta testa metode.. Tas ir enzīmu imūntests, ko izmanto, lai noteiktu HIV antivielas. Western blot nosaka specifisku proteīnu no olb altumvielu maisījuma, izmantojot marķētu antivielu.
Galvenā atšķirība
1. Pārskats un galvenā atšķirība
2. Kas ir Elisa
3. Kas ir Western Blot
4. Līdzības starp Elisa un Western Blot
5. Salīdzinājums blakus - Elisa vs Western Blot tabulas formā
6. Kopsavilkums
Kas ir Elisa?
ELISA, kas apzīmē ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu, bija pirmais tests, kas galvenokārt paredzēts HIV noteikšanai. Tas ir uz plāksnēm balstīts tests. To izmanto, lai noteiktu HIV antivielas, un šis tests uzrāda augstu jutību. Šajā tehnikā paraugā esošie antigēni saistās ar imobilizētajām antivielām uz cietas virsmas. Pēc imobilizācijas antigēni veido kompleksus ar antivielām, kas saistītas ar fermentiem. Pēc tam šie konjugētie fermenti tiek inkubēti ar attiecīgo substrātu.
Attēls 01: ELISA
Enzīmu-substrāta reakcija rada izmērāmu krāsainu produktu. Izmērot produkta daudzumu, var kvantitatīvi noteikt paraugā esošo antigēnu skaitu. Tāpēc ELISA ir ļoti specifiska un izsmalcināta tehnika, kurai nepieciešama labi kvalificētu tehniķu uzmanība. Tas ir arī laikietilpīgs process, kurā ir nepieciešams uzlabots aprīkojums.
Kas ir Western Blot?
Western blotēšana ir metode, kas ļauj noteikt konkrētu proteīnu no olb altumvielu maisījuma. Western blot ir membrāna, ko izmanto blotēšanas procedūrā, lai iegūtu spoguļattēlu proteīnu modeļiem SDS-poliakrilamīda gēlā. Western blotēšanai izmantotā membrāna galvenokārt sastāv no nitrocelulozes vai polivinilidēndifluorīda (PVDF). Membrānu ar pārnesto proteīnu var izmantot, lai identificētu konkrētu proteīnu. Lai hibridizācijas ceļā noteiktu vēlamo proteīnu, ir nepieciešama augstas kvalitātes antiviela. Antiviela saistās ar tās specifisko antigēnu un atklāj vēlamā antigēna, kas ir proteīna, klātbūtni.
2. attēls: Western Blot
Proteīnu pārvietošana no SDS poliakrilamīda gēla uz Western blot tiek veikta ar elektroblotēšanu. Tā ir efektīva un ātra metode, kas liek olb altumvielām izdalīties elektroforēzē no gēla un pāriet uz nitrocelulozes membrānu (Western blot).
Western blotēšana ir noderīga, lai cilvēka seruma paraugā noteiktu anti-HIV antivielas. Western blot var izmantot arī kā apstiprinošu testu B hepatīta infekcijai un galīgo testu govju trakuma slimībai.
Kādas ir līdzības starp Elisa un Western Blot?
- Elisa un Western blot ir divu veidu metodes, ko izmanto HIV diagnosticēšanai.
- Abu metožu pamatā ir imūndetekcijas noteikšana.
- Tie ir balstīti uz antivielu-olb altumvielu kompleksa veidošanos.
- Abas metodes var analizēt proteīnus.
- Elisa un Western blotting ir laikietilpīgas metodes.
- Lai veiktu šīs metodes, ir nepieciešams labi apmācīts un kvalificēts personāls.
Kāda ir atšķirība starp Elisa un Western Blot?
ELISA ir ļoti jutīga un ļoti sarežģīta metode, kas nosaka antigēna un antivielu klātbūtni pacienta asinīs, savukārt Western blot ir metode, kas nosaka konkrētu proteīnu no olb altumvielu maisījuma. Šī ir galvenā atšķirība starp Elisa un Western blot. Elisa ir gan kvalitatīva, gan kvantitatīva. Turpretim Western blot ir kvalitatīvs. Dažreiz tas ir daļēji kvantitatīvs. Ņemot vērā testa veikšanai nepieciešamo laiku, Elisa tests ir laikietilpīgs, savukārt Western blot ir laikietilpīgāks nekā Elisa.
Tālāk esošajā infografikā ir apkopota atšķirība starp Elisa un Western blot.
Kopsavilkums - Elisa pret Western Blot
ELISA ir ļoti jutīga un ļoti sarežģīta metode, kas nosaka antigēna un antivielu klātbūtni mūsu asinīs. No otras puses, Western blotēšanas metode ir izstrādāta, lai identificētu konkrētu proteīnu no olb altumvielu maisījuma. Šī ir galvenā atšķirība starp Elisa un Western blot. ELISA bija pirmais tests, kas paredzēts HIV noteikšanai. Lai apstiprinātu ELISA testa rezultātus, var izmantot Western Blot. Gan ELISA, gan Western blot tiek uzskatītas par netiešām HIV noteikšanas metodēm.