Galvenā atšķirība starp RIA un ELISA ir tā, ka radioimūntests (RIA) ir imūntesta metode, kurā izmanto radioizotopus, lai noteiktu antigēna-antivielu kompleksus, savukārt ar enzīmu saistītā imūnsorbcijas pārbaude (ELISA) ir imūntesta metode, kurā izmanto enzīmus, lai noteiktu antigēnu. -antivielu kompleksi.
Īpašu proteīnu, piemēram, antigēnu, noteikšana ir ārkārtīgi svarīga slimību diagnostikā. Tāpēc RIA un ELISA ir divas imūntesta metodes, ko izmanto laboratorijās, lai ātri noteiktu specifiskus proteīnus, īpaši antigēnus. Parasti specifiska antiviela saistās ar mērķa antigēnu un veido redzamu kompleksu, ko sauc par precipitīnu. Šos antivielu un antigēnu kompleksus var identificēt, izmantojot dažādas metodes. Antigēna-antivielu kompleksa noteikšanas paņēmiens, izmantojot radioizotopus, ir pazīstams kā RIA, un paņēmiens antigēna-antivielu kompleksa noteikšanai, izmantojot fermentus, ir pazīstams kā ELISA.
Kas ir RIA?
Radioimmunoassay (RIA) ir imūntesta metode, kas nosaka antigēnu un antivielu kompleksus, izmantojot radioizotopus. Rozalīna Susmena Jalova šo tehniku izstrādāja 1960. gadā ar Solomona Bersona palīdzību. Par šo ievērojamo atklājumu Rozalīna Susmena Jalova 1977. gadā ieguva Nobela prēmiju medicīnā. Parasti radioimūntestā zināms daudzums antigēna vispirms tiek padarīts radioaktīvs. Šajā paņēmienā marķēšanai bieži izmanto gamma radioaktīvos joda izotopus, ko sauc par 125-I. antigēni. Šie radioizotopi parasti saistās ar antigēna tirozīna aminoskābi. Pēc tam radioaktīvi iezīmēto antigēnu sajauc ar antivielu. Rezultātā radioaktīvi iezīmētais antigēns un antiviela īpaši saistās viens ar otru.
Vēlāk tiek pievienots seruma paraugs, kas satur nezināmu daudzumu tā paša antigēna. Tas liek nemarķētam antigēnam no seruma konkurēt ar radioaktīvi iezīmēto antigēnu par antivielu saistīšanās vietām. Palielinoties nemarķētā antigēna koncentrācijai, vairāk tā saistās ar antivielu, izspiežot radioaktīvi iezīmēto variantu. Tādējādi tas samazina ar antivielām saistītā radioaktīvi iezīmētā antigēna un brīvā radioaktīvi iezīmētā antigēna attiecību. Procedūras beigās saistītie antigēni tiek atdalīti. Galu galā brīvo antigēnu radioaktivitāti atlikušajā supernatantā mēra, izmantojot gamma skaitītāju.
Kas ir ELISA?
ELISA ir imūntesta metode, kas nosaka antigēnu un antivielu kompleksus, izmantojot fermentus. Tas ir bioķīmisks analītisks tests, ko pirmo reizi aprakstīja Engvall un Perlmann 1971. gadā. Vairumā vienkāršu ELISA metožu veidu pacienta parauga antigēni tiek piestiprināti pie cietas virsmas. Pēc tam uz virsmas tiek uzklāta atbilstoša antiviela, lai tā varētu saistīties ar antigēnu.
Attēls 01: ELISA
Šī konkrētā antiviela ir saistīta ar fermentu. Vēlāk visas nesaistītās antivielas tiek noņemtas, mazgājot ar mazgāšanas līdzekli. Šīs metodes pēdējā posmā pievieno fermenta substrātu. Ja notiek pareiza antigēna un antivielu saistīšanās, nākamā reakcija rada nosakāmu krāsu signālu, visbiežāk krāsas maiņu.
Kādas ir līdzības starp RIA un ELISA?
- RIA un ELISA ir imūntesta metodes.
- Abām metodēm piemīt antigēnu un antivielu kompleksu veidošanās.
- Šīs metodes var izmantot, lai paraugos noteiktu nezināmus proteīnus.
- Tos abus izmanto slimību diagnostikā laboratorijās.
- Abas ir ļoti specifiskas un jutīgas metodes.
Kāda ir atšķirība starp RIA un ELISA?
RIA ir imūntesta metode antigēna-antivielu kompleksa noteikšanai, izmantojot radioizotopus. ELISA ir imūntesta metode antigēna-antivielu kompleksa noteikšanai, izmantojot fermentus. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp RIA un ELISA. Turklāt RIA tehnikā antigēns ir marķēts, bet ELISA – antiviela ir marķēta. Turklāt RIA tehnikā marķēšanas molekulas ir radioizotopi, savukārt ELISA gadījumā marķēšanas molekulas ir fermenti. Tādējādi šī ir vēl viena atšķirība starp RIA un ELISA.
Tālāk esošajā infografikā tabulas veidā parādītas vairāk atšķirību starp RIA un ELISA.
Kopsavilkums - RIA pret ELISA
Imunotestiem ir ļoti svarīga loma dažādos bioanalītiskos apstākļos, piemēram, klīniskajā diagnostikā, biofarmaceitiskajā analīzē, vides uzraudzībā, bioloģiskajā drošībā un pārtikas testēšanā. Kopš 1960. gadiem ir izstrādāts plašs imūntestu klāsts. RIA un ELISA ir imūntesta metodes. RIA ir imūntesta metode antigēna-antivielu kompleksa noteikšanai, izmantojot radioizotopus. ELISA ir imūntesta metode antigēna-antivielu kompleksa noteikšanai, izmantojot fermentus. Tādējādi šis ir kopsavilkums par atšķirību starp RIA un ELISA.
