Galvenā atšķirība starp nokautēšanu un nokautēšanu ir atkarīga no metodes, ko izmanto, lai izveidotu transgēnu organismu. Gēnu knock in gadījumā notiek jauna gēna ievietošana, savukārt gēna izslēgšanas gadījumā notiek esoša gēna noņemšana, lai izveidotu transgēnu organismu.
Transgēnie organismi ir organismi ar izmainītu ģenētisko uzbūvi. “Rekombinantie organismi” ir to sinonīms. Vairumā gadījumu transgēniem organismiem ir labvēlīgas īpašības. Radot transgēnus organismus, par mērķi kļūst gēni. Atbilstoši nepieciešamībai gēnu var ievadīt vai izņemt. Gēnu izslēgšana attiecas uz jauna gēna ieviešanu, savukārt gēna izslēgšana attiecas uz gēna izņemšanu.
Kas ir Knock In?
Knock in jeb gēnu knock in ir jauna gēna ievietošanas process organismā. Ievietotajam gēnam pēc ievietošanas ir jābūt funkcionālam. Gēnu ievadīšanas procesu veic dažādas gēnu inženierijas tehnikas. Pēc gēna piespiešanas notiek transgēna organisma radīšana. Rekombinantās DNS tehnoloģija attiecas arī uz gēna ievadīšanas procesu. Šajā procesā, izmantojot restrikcijas enzīmus, noteiktās vietās ir jāsagriež organisma genoms, un tad notiek mērķa gēna ievietošana. Pēc ievietošanas ligāzes enzīms noslēdz jauno gēnu genomā, radot rekombinantu organismu.
Rekombinantos mikroorganismus bieži izmanto, lai rūpnieciskā mērogā ražotu vēlamos produktus, piemēram, vitamīnus, fermentus, hormonus. Turklāt gēna piespiešana pelēm parasti tiek izmantota pētniecības nolūkos. Tie parāda, kā dažādi gēni izpaužas un uzvedas dažādos vides un medicīniskos apstākļos. Tāpēc ir svarīgi pelēm izmantot gēnu knock, lai noteiktu lielāko daļu dažādu slimību ārstēšanas.
Kas ir nokauts?
Nokauts jeb gēnu nokauts ir gēna pilnīgas izņemšanas process no organisma. Šis konkrētais gēns tiek pilnībā deaktivizēts izslēgšanas procesa laikā. Lai izslēgtu gēnu, ir nepieciešamas dažādas gēnu inženierijas metodes. Iegūtais organisms ir transgēns organisms ar mainītu ģenētisko sastāvu. Konkrēta gēna pilnīga dezaktivācija notiek, ieviešot mutāciju konkrētajā gēnā vai noņemot konkrēto gēna fragmentu ar restrikcijas palīdzību.
2. attēls: Gene Knockout peles
Pirmkārt, gēnu izslēgšana bija saistīta tikai ar baktēriju Escherichia coli. Tomēr šobrīd ir izveidotas daudzas nokautas peles. Nokautām pelēm ir svarīga loma pētniecībā. Tie sniedz secinājumus par to, kā noteiktu gēnu dzēšana ietekmē organisma izdzīvošanu un pastāvēšanu. Tomēr šim jēdzienam ir daudz ētisku ierobežojumu.
Gēnu izslēgšanai ir svarīga loma dažādu veselības stāvokļu ģenētikas analīzē un dažādu gēnu terapijas efektivitātes novērtēšanā.
Kādas ir līdzības starp Knock In un Knockout?
- Abos izmanto rekombinantās DNS tehnoloģiju un dažādas ģenētiskās metodes.
- Gēnu iekļūšana un izslēgšana noved pie transgēna organisma radīšanas.
- Tos var veikt jebkura organizatoriskā līmeņa dzīvajiem organismiem.
- Mēs plaši izmantojam abas metodes pētniecībā un rūpniecībā.
Kāda ir atšķirība starp Knock In un Knockout?
Atšķirība starp nokautēšanu un nokautēšanu ir atkarīga no transgēna organisma ražošanas tehnikas. Knock in jeb gēna piespiešana ir jauna gēna ievietošanas process organismā. Turpretim gēnu izslēgšana ir vēlamā gēna pilnīgas deaktivizēšanas vai noņemšanas process. Katra metode rada atšķirīgus rezultātus atkarībā no izmaiņām.
Tālāk esošajā infografikā ir sniegta plašāka informācija par atšķirību starp sitienu un nokautu.
Kopsavilkums - Knock In vs Knockout
Knock in un knockout attiecas uz divām metodēm, kā izveidot transgēnus organismus, ievietojot vai pilnībā deaktivizējot gēnus. Tādējādi šīs divas metodes ir svarīgas pētniecībā un dažādos rūpnieciskos lietojumos. Rekombinantās DNS tehnoloģija ir šo gēnu ievadīšanas un gēnu izslēgšanas process. Gēnu knock in un nokauts spēlē labvēlīgu lomu; tomēr zinātnieku aprindās tiek apspriests jautājums par ētiskajiem ierobežojumiem, kas ir saistīti ar gēnu iejaukšanas un izslēgšanas radīšanu. Tātad, šeit ir apkopota atšķirība starp sitienu un nokautu.
