Galvenā atšķirība starp HEK293 un HEK293t ir tāda, ka HEK293 ir iemūžināta šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka embrija nierēm, kas ir transficēta ar nogrieztu cilvēka adenovīrusa tipa 5DNS, savukārt HEK293t ir meitas šūnu līnija, kas iegūta no sākotnējās HEK293 šūnu līnijas, kas ir transficēts ar plazmīdas vektoru, kas satur SV40 replikācijas sākumpunktu.
Transfekciju parasti definē kā svešas DNS un RNS ievadīšanas procesu šūnās, lai ietekmētu to genotipu un fenotipu. Šāda svešu nukleīnskābju ievadīšana, izmantojot dažādas bioloģiskas, ķīmiskas un fizikālas metodes, var mainīt šūnas īpašības. Galu galā tas ļauj pētīt gēnu funkciju un olb altumvielu ekspresiju šūnas kontekstā. HEK293 un HEK293t ir divas šūnu līnijas, kas daudzus gadus ir plaši izmantotas šūnu bioloģijas pētījumos, jo tām ir tendence uz transfekciju.
Kas ir HEK293?
HEK293 ir iemūžināta šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka embrija nierēm, kas tiek transficēta ar nogrieztu cilvēka adenovīrusa 5. tipa DNS, lai ražotu daudzus rekombinantos proteīnus. Sākotnēji HEK293 no cilvēka nieru šūnām izolēja holandiešu biologs Alekss Van der Ebs 1973. gadā. Šīs šūnas tika audzētas audu kultūrā no sievietes augļa. Vēlāk Frenks Grehems, Van der Eba laboratorijas pēcdoktorants, tos transfekēja ar nogrieztu cilvēka adenovīrusa 5. tipa DNS. Šī šūnu līnija tika nosaukta HEK293, jo tas bija Frenka eksperiments 293rd.
Attēls 01: HEK293
Adenovīrusu gēnu iekļaušana HEK šūnu genomā ļauj šīm šūnām ļoti efektīvi ražot lielu daudzumu rekombinanto proteīnu. Turklāt adenovīrusa vektors satur CMV promotora reģionu; tādējādi tas vēl vairāk palielina šo efektivitāti. Šī šūnu līnija ir izmantota kā saimnieks gēnu ekspresijas pētījumos. Šo šūnu līniju izmanto arī biotehnoloģijas nozare, lai ražotu ārstnieciskās olb altumvielas gēnu terapijai.
Kas ir HEK293t?
HEK293t ir meitas šūnu līnija, kas iegūta no sākotnējās HEK293 šūnu līnijas, kas ir transfekēta ar plazmīdas vektoru, kas satur SV40 replikācijas sākumpunktu, lai iegūtu lielu daudzumu rekombinanto proteīnu. HEK293t ir cilvēka šūnu līnija, kas ekspresē SV40 lielā T antigēna mutantu versiju. HEK293t tika izveidots Michele Carlos laboratorijā Stenfordā, stabili transfekējot HEK29E šūnu līniju ar plazmīdu, kas kodē SV40 lielā T antigēna temperatūras jutīgu mutantu. Sākotnēji tas tika saukts par 293/tsA1609neo. Tas ir tāpēc, ka transfekcija tika izmantota, lai izveidotu šūnu līniju, kas nodrošina neomicīna rezistenci un SV40 lielā T antigēna tsA 1609 alēles ekspresiju.
2. attēls: HEK293t
Sakarā ar SV40 lielā T antigēna mutācijas versijas ekspresiju, transfektētās plazmīdas ar SV 40 replikācijas sākumu var ievērojami palielināt rekombinantā proteīna daudzumu. Šo šūnu līniju parasti izmanto biotehnoloģijas nozarē proteīnu ekspresijai un rekombinanto retrovīrusu ražošanai.
Kādas ir līdzības starp HEK293 un HEK293t?
- HEK293 un HEK293t ir divas šūnu līnijas, kas ir plaši izmantotas šūnu bioloģijas pētījumos, jo tām ir tendence uz transfekciju.
- Abas šūnu līnijas ir iegūtas laboratorijā.
- Šīs šūnu līnijas var ievērojami palielināt rekombinanto proteīnu ražošanas apjomu.
- Tie tiek iegūti, transfektējot cilvēka embriju nieru šūnas ar plazmīdas vektoru.
Kāda ir atšķirība starp HEK293 un HEK293t?
HEK293 ir iemūžināta šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka embrija nierēm, kas ir transficēta ar nogrieztu cilvēka adenovīrusa 5. tipa DNS. Turpretim HEK293t ir meitas šūnu līnija, kas iegūta no sākotnējās HEK293 šūnu līnijas, kas ir transficēta ar plazmīdas vektoru, kas satur SV40 replikācijas sākumpunktu. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp HEK293 un HEK293t. Turklāt HEK293 neizpauž SV40 lielā T antigēna mutantu versiju. No otras puses, HEK293t izsaka SV40 lielā T antigēna mutantu versiju.
Šajā infografikā tabulas veidā ir norādītas atšķirības starp HEK293 un HEK293t, lai salīdzinātu līdzās.
Kopsavilkums - HEK293 pret HEK293t
HEK293 un HEK293t ir divas šūnu līnijas, kas ir plaši izmantotas šūnu bioloģijas pētījumos to vienmērīgās augšanas un transfekcijas tieksmes dēļ. HEK293 ir iemūžināta šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka embrija nieres, kas ir transficēta ar nogrieztu cilvēka adenovīrusa tipa 5DNS, savukārt HEK293t ir meitas šūnu līnija, kas iegūta no HEK293 sākotnējās šūnu līnijas, kas ir transficēta ar plazmīdas vektoru, kas satur SV40 replikācijas sākumpunktu. Tādējādi šeit ir apkopota atšķirība starp HEK293 un HEK293t.
