Galvenā atšķirība starp DNS un RNS izolēšanu ir tāda, ka DNS izolēšana ir procedūra, kurā no bioloģiskās šūnas ekstrahē nukleīnskābes veidu, ko sauc par DNS, savukārt RNS izolēšana ir procedūra, kurā tiek iegūts nukleīnskābes veids, ko sauc par RNS. ekstrahēts no bioloģiskas šūnas.
Nukleīnskābes izolācija ir sākumpunkts plašam pakārtotu lietojumu klāstam. Nukleīnskābju augstā kvalitāte sākuma paraugos ir galvenais faktors turpmāko pakārtoto lietojumu panākumiem. Nukleīnskābes izolāciju var definēt kā darbību virkni, lai iegūtu nukleīnskābi tīrības paraugā, ko var izmantot dažādiem pakārtotiem lietošanas posmiem. Nukleīnskābju ekstrakcijas mērķis ir sadalīt šūnu membrānu un panākt maksimālu lipīdu un olb altumvielu elimināciju, lai iegūtu tīras nukleīnskābes, piemēram, DNS vai RNS.
Kas ir DNS izolācija?
DNS izolēšana ir parasta procedūra, kurā no bioloģiskās šūnas ekstrahē nukleīnskābes veidu, ko sauc par DNS. DNS izolāciju veic, ekstrahējot DNS no asinīm, saldētiem audu paraugiem un parafīna audu blokiem. DNS izolācijā ir trīs galvenie posmi, tostarp šūnu līze, DNS ekstrakcija un nogulsnēšana. Šūnu līzē šūnas paraugā bieži tiek atdalītas viena no otras ar fiziskiem līdzekļiem, piemēram, slīpēšanu vai virpuļošanu, un ievieto šķīdumā, kas satur sāli. Parasti sālī esošie pozitīvi lādētie nātrija joni palīdz aizsargāt negatīvi lādētās fosfātu grupas, kas iet gar DNS mugurkaulu. Vēlāk tiek pievienots mazgāšanas līdzeklis, lai sadalītu lipīdus šūnu membrānā un kodolos, kas atbrīvo DNS, jo šīs membrānas tiek izjauktas.
Attēls 01: DNS izolācija
DNS ekstrakcija tiek veikta, lai iegūtu tīru DNS paraugu. Bieži vien tiek pievienots proteāzes enzīms, lai noārdītu ar DNS saistītus proteīnus un citus šūnu proteīnus. Turklāt daļu no šūnu atkritumiem var noņemt, filtrējot paraugu. Visbeidzot, DNS tiek izgulsnēta, izmantojot spirtu. Turklāt, ja ir daudz DNS, procedūras beigās var novērot skopas b altas nogulsnes.
Kas ir RNS izolācija?
RNS izolēšana ir procedūra, kurā no bioloģiskās šūnas ekstrahē nukleīnskābes veidu, ko sauc par RNS. Šo procedūru bieži sarežģī ribonukleāzes enzīmu klātbūtne šūnās un audos, kas noārda RNS. Molekulārajā bioloģijā RNS izolēšanai no paraugiem izmanto vairākas metodes, piemēram, guanidīnija-tiocianāta-fenola-hloroforma ekstrakciju.
2. attēls: RNS izolācija
RNS izolēšana parasti sastāv no vairākiem posmiem, ieskaitot šūnu līzi un homogenizāciju, bioķīmisko procesu apturēšanu, nukleīnskābju sadalīšanu, RNS izguvi, neapstrādātu attīrīšanu un RNS kvalitātes novērtēšanu. Filtrpapīra bāzes līzes un eluēšanas metodei ir augsta caurlaidspēja RNS ekstrakcijā. Turklāt RNS ekstrakcija šķidrā slāpeklī, izmantojot javu un piestu, arī ir ļoti noderīga metode, jo tā novērš ribonukleāzes aktivitāti.
Kādas ir līdzības starp DNS un RNS izolāciju?
- DNS un RNS izolēšana ir divu veidu nukleīnskābju izolācijas procedūras.
- Abām procedūrām ir līdzīgas pamata darbības, piemēram, šūnu līze, ekstrakcija un attīrīšana.
- Šīs procedūras izdala svarīgus nukleīnskābju tipus, kuriem ir vairākas pakārtotas pielietošanas iespējas.
- Tās tiek veiktas laboratorijas iestatījumos.
- Tos var veikt, izmantojot ražotos komplektus.
Kāda ir atšķirība starp DNS un RNS izolāciju?
DNS izolācijā nukleīnskābes veids, ko sauc par DNS, tiek ekstrahēts no bioloģiskas šūnas, savukārt RNS izolācijā no bioloģiskās šūnas tiek ekstrahēts nukleīnskābes veids, ko sauc par RNS. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp DNS un RNS izolāciju. Turklāt DNS izolāciju parasti veic pie aptuveni pH 7 līdz 8, turpretim RNS izolēšanu parasti veic pie aptuveni pH 4,5.
Tālāk esošajā infografikā tabulas veidā ir parādītas atšķirības starp DNS un RNS izolāciju, lai tos varētu salīdzināt.
Kopsavilkums - DNS pret RNS izolāciju
DNS un RNS izolēšana ir divu veidu nukleīnskābju izolācijas procedūras. DNS izolēšana ir procedūra, kuras laikā DNS tiek iegūta no bioloģiskās šūnas. RNS izolēšana ir procedūra, kuras laikā RNS tiek ekstrahēta no bioloģiskās šūnas. Tātad šī ir galvenā atšķirība starp DNS un RNS izolāciju.
