Galvenā atšķirība - plūsmas citometrija pret FACS
Šūnu teorijas kontekstā šūnas ir visu dzīvo organismu strukturālā un funkcionālā pamatvienība. Šūnu šķirošana ir metodika, ko izmanto dažādu šūnu atdalīšanai atbilstoši fizioloģiskajām un morfoloģiskajām iezīmēm. Tiem var būt intracelulāras vai ārpusšūnu īpašības. DNS, RNS un proteīnu mijiedarbība tiek uzskatīta par intracelulārām interaktīvām īpašībām, savukārt forma, izmērs un dažādi virsmas proteīni tiek uzskatīti par ārpusšūnu īpašībām. Mūsdienu zinātnē šūnu šķirošanas metodoloģijas ir palīdzējušas dažādos pētījumos bioloģiskajos pētījumos, kā arī jaunu principu ieviešanā, pētot medicīnu. Šūnu šķirošana tiek veikta, izmantojot dažādas metodoloģijas, kas ietver gan primitīvus ar mazāku aprīkojumu, gan progresīvu tehnoloģisko metodiku, izmantojot sarežģītas iekārtas. Plūsmas citometrija, fluorescējošo aktivēto šūnu šķirošana (FACS), magnētiskā šūnu atlase un vienas šūnas šķirošana ir galvenās izmantotās metodoloģijas. Plūsmas citometrija un FACS ir izstrādāti, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām. FACS ir specializēts plūsmas citometrijas veids. Plūsmas citometrija ir metodika, kas tiek izmantota heterogēnas šūnu populācijas analīzē pēc dažādām šūnu virsmas molekulām, izmēra un tilpuma, kas ļauj izmeklēt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu parauga maisījumu sašķiro divos vai vairākos traukos atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām. Šī ir galvenā atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.
Kas ir plūsmas citometrija?
Plūsmas citometrija ir metode, ko izmanto, lai pārbaudītu un noteiktu intracelulāro molekulu un šūnu virsmas ekspresiju, kā arī noteiktu un raksturotu atšķirīgus šūnu tipus. To izmanto arī šūnu tilpuma un lieluma noteikšanai un izolēto apakšpopulāciju tīrības novērtēšanai. Tas ļauj veikt vairāku parametru atsevišķu šūnu novērtēšanu aptuveni vienā un tajā pašā laikā. Plūsmas citometriju izmanto, lai mērītu fluorescences intensitāti, ko rada fluorescējoši iezīmētas antivielas, kas palīdz identificēt proteīnus vai ligandus, kas saistās ar saistītajām šūnām.
Attēls 01: plūsmas citometrija
Parasti plūsmas citometrija galvenokārt ietver trīs apakšsistēmas. Tie ir šķidrumi, elektronika un optika. Plūsmas citometrijā ir pieejamas piecas galvenās sastāvdaļas, kuras izmanto šūnu šķirošanā. Tie ir plūsmas elementi (šķidruma plūsma, ko izmanto, lai tos transportētu un pielāgotu šūnas optiskajam sensoram), mērīšanas sistēma (var būt dažādas sistēmas, tostarp dzīvsudraba un ksenona lampas, lielas jaudas ūdens dzesēšanas vai mazjaudas gaisa dzesēšanas lāzeri vai diožu lāzeri), ADC; Analog-digital Converter sistēma, pastiprināšanas sistēma un dators analīzei. Iegūšana ir process, kurā dati tiek savākti no paraugiem, izmantojot plūsmas citometru. Šo procesu veic dators, kas ir savienots ar plūsmas citometru. Datorā esošā programmatūra analizē informāciju, kas datoram tiek ievadīta no plūsmas citometra. Programmatūrai ir arī iespēja pielāgot eksperimenta parametrus, kas kontrolē plūsmas citometru.
Kas ir FACS?
Plūsmas citometrijas kontekstā fluorescences aktivēto šūnu šķirošana (FACS) ir metode, ko izmanto, lai diferencētu un šķirotu bioloģisko šūnu maisījuma paraugu. Šūnas ir atdalītas no diviem vai vairākiem konteineriem. Šķirošanas metode ir balstīta uz šūnas fiziskajām iezīmēm, kas ietver šūnas gaismas izkliedi un fluorescences īpašības. Tas ir svarīgs zinātnisks paņēmiens, ko var izmantot, lai iegūtu ticamus kvantitatīvus un kvalitatīvus fluorescences signālu rezultātus, kas tiek emitēti no katras šūnas. FACS laikā sākotnēji tika iegūts šūnu maisījums; suspensija tiek virzīta uz šauras šķidruma plūsmas centru, kas strauji plūst. Šķidruma plūsma ir paredzēta, lai atdalītu šūnas suspensijā, pamatojoties uz katras šūnas diametru. Suspensijas straumei tiek pielietots vibrācijas mehānisms, kā rezultātā veidojas atsevišķi pilieni.
2. attēls: FACS
Sistēma ir kalibrēta, lai izveidotu vienu pilienu ar vienu šūnu. Tieši pirms pilienu veidošanās plūsmas suspensija pārvietojas pa fluorescences mērīšanas aparātu, kas nosaka katrai šūnai raksturīgo fluorescenci. Pilienu veidošanās vietā tiek novietots elektriskās uzlādes gredzens, kuram pirms fluorescences intensitātes mērīšanas tiek inducēts lādiņš. Kad no suspensijas plūsmas veidojas pilieni, pilienos tiek iesprostots lādiņš, kas pēc tam nonāk elektrostatiskās novirzes sistēmā. Saskaņā ar lādiņu sistēma novirza pilienus dažādos konteineros. Maksas piemērošanas metode atšķiras atkarībā no dažādām FACS izmantotajām sistēmām. FACS izmantotais aprīkojums ir pazīstams kā fluorescences aktivizēts šūnu šķirotājs.
Kāda ir līdzība starp plūsmas citometriju un FACS?
Plūsmas citometrija un FACS ir izstrādātas, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām
Kāda ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS?
Plūsmas citometrija pret FACS |
|
| Plūsmas citometrija ir metodika, ko izmanto neviendabīgas šūnu populācijas analīzei atbilstoši dažādām šūnu virsmas molekulām, izmēram un tilpumam, kas ļauj izmeklēt atsevišķas šūnas. | FACS ir process, kurā šūnu maisījuma paraugi tiek sašķiroti divos vai vairākos konteineros atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām. |
Kopsavilkums - plūsmas citometrija pret FACS
Šūna ir visu dzīvo organismu strukturālā un funkcionālā pamatvienība. Šūnu šķirošana ir process, kurā šūnas tiek izolētas un diferencētas dažādās kategorijās, pamatojoties uz to intracelulārajām un ārpusšūnu īpašībām. Plūsmas citometrija un FACS ir divas svarīgas metodikas šūnu šķirošanā. Abi procesi ir izstrādāti, lai diferencētu šūnas pēc to optiskajām īpašībām. Plūsmas citometrija ir metodika, kas tiek izmantota heterogēnas šūnu populācijas analīzē pēc dažādām šūnu virsmas molekulām, izmēra un tilpuma, kas ļauj izmeklēt atsevišķas šūnas. FACS ir process, kurā šūnu parauga maisījumu sašķiro divos vai vairākos traukos atbilstoši to gaismas izkliedes un fluorescences īpašībām. Šī ir atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS.
Lejupielādēt plūsmas citometrijas vs FACS PDF versiju
Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistē saskaņā ar atsauces piezīmi. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp plūsmas citometriju un FACS
