Galvenā atšķirība starp ievietošanas un aizstāšanas vektoriem ir tāda, ka ievietošanas vektoram ir iespēja ievietot vidēji garu svešu DNS, savukārt aizstājējvektoram ir iespēja uzņemt lielākus svešas DNS garumus.
Fāgu vektori ir bakteriofāgi, ko izmanto klonēšanai. Ir divu veidu fāgu vektori; tie ir ievietošanas vektors un aizstāšanas vektors. Turklāt visi fāgu vektori sastāv no nebūtiskiem gēniem. Tomēr šie gēni ir jāizņem no fāgiem, lai atvieglotu jaunu svešu DNS ieliktņu rašanos.
Kas ir ievietošanas vektors?
Pirmkārt, ievietošanas vektors ir vienkāršākā lambda klonēšanas vektoru forma. Faktiski tas ir fāga vektora veids, kuram ir unikāla restrikcijas vieta, kas ievadīta vektora genomā neobligātās DNS pozīcijā. Turklāt fāga DNS paliek bez noņemšanas. Šī fāga DNS neizņemšana samazina vektorā klonējamo ieliktņu (svešās DNS) lielumu. Turklāt šie vektori ir noderīgi cDNS klonēšanai un ekspresijai. GT10, GT11 un Zap ir šī vektora piemēri.
Attēls 01: Lambda fāga
Ievietošanas vektors sastāv no vienas atpazīšanas vietas. Šī vektora galvenā funkcija ir izveidot cDNS bibliotēkas, kas iegūtas no eikariotu mRNS sekvencēm. Turklāt tas var uzņemt tikai svešas DNS garumus, kas svārstās no 05 līdz 11 kb. Turklāt tai ir unikāla šķelšanās vieta svešas DNS ievietošanai.
Kas ir aizstāšanas vektori?
Aizvietošanas vektors vai aizvietošanas vektors ir fāga vektora veids, kas izveidots, atdalot fāga DNS vidējo “pildvielas fragmenta” reģionu. Vēlamais svešās DNS ieliktnis aizstāj fāga DNS.
Attēls 02: Aizstāšanas vektors
Aizvietošanas vektori ir svarīgi, veidojot genoma bibliotēkas, piemēram, EMBL4 un Charon40. Šie vektori var uzņemt lielāku svešas DNS garumu no 08 līdz 24 kb. Pildvielas apgabals sastāv arī no gēna, kas padara fāga vektoru dzīvotnespējīgu baktēriju saimniekorganismā.
Kādas ir līdzības starp ievietošanas un aizstāšanas vektoriem?
- Ievietošanas un aizstāšanas vektori ir fāgu vektori.
- Abos vektori ir iekļauti svešas DNS ieliktņi.
- Tie abi ir noderīgi DNS bibliotēku izveidē.
Kāda ir atšķirība starp ievietošanas un aizstāšanas vektoriem?
Ievietošana pret aizstāšanas vektoriem |
|
| Ievietošanas vektors ir fāga vektora veids, kuram fāga genomā ir ieviesta restrikcijas vieta neobligātās DNS vietā. | Aizvietošanas vektors ir fāga vektora veids, kas izveidots, atdalot fāga DNS vidējo “pildvielas fragmenta” reģionu |
| Ievietoto fragmentu lielums | |
| 05–11 kb garums | 08-24 kb garums |
| Filler Fragment | |
| Nav pildvielas fragmenta | Aizpildījuma fragments tiek aizstāts ar svešu ieliktni |
| Funkcija | |
| Svarīgi izveidot cDNS bibliotēkas | Svarīgi, veidojot genoma bibliotēkas |
| Piemēri | |
| GT10, GT11 un Zap ir piemēri | EMBL4 un Charon40 ir piemēri |
| Cleavage Site | |
| Ir pieejama unikāla šķelšanās vieta | Šelšanas vieta satur gēnus, kas nav būtiski lītiskajam ciklam |
Kopsavilkums - ievietošanas un aizstāšanas vektori
Gan ievietošanas, gan aizstāšanas vektori ir divu veidu fāgu vektori. Abiem vektoriem ir restrikcijas vietas, kas atvieglo jaunu svešu DNS ievietošanu. Ievietošanas vektori ir svarīgi, veidojot cDNS bibliotēkas, savukārt aizstājējvektori ir svarīgi genoma bibliotēku izveidē. Turklāt ievietošanas vektori ietver vidēja garuma DNS ieliktņus. Taču aizvietojošie vektori var uzņemt garākus svešas DNS ieliktņus. Kopumā šī ir galvenā atšķirība starp ievietošanas un aizstāšanas vektoriem.
