Galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu ir tāda, ka gēnu amplifikācija ir process, kurā tiek iegūtas daudzas interesējošā gēna kopijas in vitro ar polimerāzes ķēdes reakciju. Taču gēnu klonēšana ir process, kurā tiek izgatavotas daudzas interesējošā gēna kopijas in vivo, izveidojot rekombinanto plazmīdu un pārveidojot to saimniekbaktērija.
Gēns ir specifisks DNS fragments, kas kodē proteīnu. Organismam ir tūkstošiem gēnu. Turklāt, izmantojot molekulāri bioloģiskās metodes, ir iespējams pavairot svarīgu gēnu DNS sekvences. Gēnu amplifikācija un gēnu klonēšana ir divas šādas procedūras. Abas procedūras rada daudzas interesējošā gēna kopijas. Tomēr pastāv atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu to metodoloģijas ziņā.
Kas ir gēnu amplifikācija?
Gēnu pastiprināšana ir noteikta gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju. Lai pastiprinātu gēnu, šī konkrētā organisma DNS ir jāizņem, izmantojot atbilstošu DNS ekstrakcijas protokolu. Pēc tam ekstrahētā divpavedienu DNS jādenaturē, lai iegūtu atdalītas atsevišķas virknes. Nākamais solis ietver PCR reakcijas izmantošanu, lai izveidotu interesējošā gēna kopijas. Turklāt PCR maisījums satur nepieciešamos praimerus, nukleotīdus, DNS polimerāzes enzīmu, šablona DNS un citas sastāvdaļas. ĶTR programmas beigās notiek interesējošā gēna amplifikācija.
Attēls 01: Gēnu amplifikācija
Turklāt gēnu amplifikācija ir sākotnējais solis konkrētas secības noteikšanā, organisma identificēšanā, slimību diagnostikā un gēnu bibliotēku veidošanā utt.
Kas ir gēnu klonēšana?
Gēnu klonēšana ir gēnu inženierijas metode, lai izveidotu gēnu bibliotēkas vai daudzas interesējošā gēna kopijas. Šis process ietver rekombinantās plazmīdas izgatavošanu un rekombinantās plazmīdas pārveidošanu saimniekšūnā, īpaši baktēriju šūnā. Klons ir identiska oriģinālā organisma vai molekulas kopija. Gēnu klonēšana var izveidot tūkstošiem gēnu klonu.
2. attēls: gēnu klonēšana
Kad interesējošais gēns ir identificēts, to var atdalīt no konkrēta organisma genoma, ierobežojot to ar specifiskiem restrikcijas enzīmiem. Pēc tam, izmantojot to pašu restrikcijas enzīmu, ir jāatver plazmīdas (vektori), lai ievietotu gēna fragmentu. Pēc tam rekombinantā plazmīda tiek pārveidota par saimniekbaktēriju, izmantojot dažādas metodes, piemēram, elektroporāciju. Dažas no rekombinantajām plazmīdām nonāk saimniekbaktēriju šūnās. Izmantojot antibiotiku, transformētās baktērijas var atlasīt, izolēt un kultivēt svaigā barotnē. Tādējādi šis paņēmiens palīdz iegūt miljoniem gēnu klonu.
Kādas ir līdzības starp gēnu pastiprināšanu un gēnu klonēšanu?
- Gēnu amplifikācija un gēnu klonēšana ir divas molekulāri bioloģiskas metodes.
- Abās šajās tehnikās konkrēta DNS sekvence vai gēns reizina miljonos vai tūkstošos reižu.
- Turklāt abas metodes ir ārkārtīgi svarīgas daudzās zinātnes jomās.
Kāda ir atšķirība starp gēnu pastiprināšanu un gēnu klonēšanu?
Gēnu amplifikācija ir process, kurā tiek izgatavotas konkrēta gēna kopijas, izmantojot in vitro metodi, ko sauc par PCR. No otras puses, gēnu klonēšana ir process, kurā tiek izgatavotas konkrēta gēna kopijas, izmantojot in vivo metodi, konstruējot rekombinantos vektorus un pavairojot tos dzīvā organismā. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu. Turklāt gēnu amplifikācija aizņem tikai dažas stundas, savukārt gēnu klonēšana aizņem vairākas dienas. Tāpēc mēs to varam uzskatīt arī par atšķirību starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu. Turklāt gēnu amplifikācijas process parāda mazāk kļūdu, savukārt gēnu klonēšanas process parāda vairāk kļūdu.
Šajā infografikā ir apkopota atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu.
Kopsavilkums - gēnu amplifikācija pret gēnu klonēšanu
Gēnu amplifikācija ir vajadzīgā gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju in vitro apstākļos, savukārt gēnu klonēšana ir interesējošā gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot rekombinantas DNS molekulu un dzīvu organismu/saimnieku. baktērija. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu.
