Galvenā atšķirība starp diferenciālo un blīvuma gradienta centrifugēšanu ir tāda, ka diferenciālā centrifugēšana maisījumā atdala daļiņas, pamatojoties uz daļiņu izmēru, turpretim blīvuma gradienta centrifugēšana atdala daļiņas maisījumā, pamatojoties uz daļiņu blīvumu.
Centrifugēšana ir dažādu komponentu atdalīšanas metode analizējamā maisījuma sastāvā. Šī metode ietver parauga rotāciju ap fiksētu asi, kas izraisa centrbēdzes spēka veidošanos. Centrbēdzes spēks liek paraugā esošajām daļiņām pārvietoties pa šķidru vidi. Šis process izraisa dažāda izmēra un blīvuma daļiņu vai šūnu sedimentāciju ar atšķirīgu ātrumu.
Kas ir diferenciālā centrifugēšana?
Diferenciālā centrifugēšana ir analītisks paņēmiens, kurā mēs varam atdalīt daļiņas maisījumā atkarībā no daļiņu lieluma. Tas ir vienkāršākais centrifugēšanas veids, ko sauc arī par diferenciālo granulēšanu. Šī metode ir svarīga komponentu atdalīšanai šūnā. Dažāda izmēra daļiņas centrifugēšanas laikā tiek nogulsnētas dažādos ātrumos. Citiem vārdiem sakot, lielas daļiņas nogulsnējas ātrāk nekā mazākas daļiņas. Turklāt sedimentācijas ātrumu var palielināt, palielinot centrbēdzes spēku.
Apsverot tās pielietojumu, diferenciālā centrifugēšana ir noderīga šūnu savākšanai vai neapstrādātu subcelulāru frakciju iegūšanai no audu homogenāta. Piem. aknu homogenāts satur kodolus, mitohondrijus, lizosomas un membrānas pūslīšus. Ja mēs centrifugējam šo homogenātu ar mazu ātrumu un īsu laiku, mēs varam iegūt lielos kodolus kā granulu. Ja mēs izmantojam lielu centrbēdzes spēku, mēs varam iegūt mitohondrijas granulā. Tomēr bioloģiskie paraugi vienmēr ir pakļauti piesārņojumam.
Kas ir blīvuma gradienta centrifugēšana?
Blīvuma gradienta centrifugēšana ir analītisks paņēmiens, kurā mēs varam atdalīt daļiņas analizējamā maisījumā, pamatojoties uz daļiņu blīvumu. Šajā metodē vielas tiek koncentrētas cēzija sāļu šķīdumā vai saharozē. Metode ietver daļiņu frakcionēšanu, pamatojoties uz peldspējas blīvumu. Šajā metodē blīvuma gradients ir cēzija sāls vai saharozes vide. Ir divu veidu blīvuma gradienta centrifugēšana: ātruma zonla centrifugēšana un izopikniskā centrifugēšana.
Ātrumzonas centrifugēšana ietver separācijas materiālu, kam ir slāņaina struktūra ar šauru zonu virs blīvuma gradienta. Šajā procesā daļiņām ir tendence pārvietoties dažādos ātrumos centrbēdzes spēka ietekmē atkarībā no daļiņu blīvuma. Parasti visas daļiņas veido granulas, jo daļiņu blīvums ir lielāks par blīvuma gradientu.
Izopikniskā centrifugēšana ir otrā veida blīvuma gradienta centrifugēšanas metode. Tas sākas ar viendabīgu šķīdumu. Centrbēdzes spēka ietekmē daļiņas analizējamā maisījumā pārvietojas, līdz daļiņu blīvums ir līdzīgs blīvuma gradientam. Tāpēc šo paņēmienu varam nosaukt arī par līdzsvara centrifugēšanu.
Kāda ir atšķirība starp diferenciālo un blīvuma gradienta centrifugēšanu?
Diferenciālā un blīvuma gradienta centrifugēšana ir divu veidu centrifugēšanas procesi, kas saistīti ar analītu maisījuma komponentu atdalīšanu. Galvenā atšķirība starp diferenciālo un blīvuma gradienta centrifugēšanu ir tāda, ka diferenciālā centrifugēšana maisījumā atdala daļiņas, pamatojoties uz daļiņu izmēru, turpretim blīvuma gradienta centrifugēšana atdala daļiņas maisījumā, pamatojoties uz daļiņu blīvumu.
Zemāk infografikā ir norādītas vairāk atšķirības starp diferenciālo un blīvuma gradienta centrifugēšanu.
Kopsavilkums - diferenciālā pret blīvuma gradienta centrifugēšana
Diferenciālā un blīvuma gradienta centrifugēšana ir divu veidu centrifugēšanas procesi, kas saistīti ar analītu maisījuma komponentu atdalīšanu. Galvenā atšķirība starp diferenciālo un blīvuma gradienta centrifugēšanu ir tāda, ka diferenciālā centrifugēšana maisījumā atdala daļiņas, pamatojoties uz daļiņu izmēru, turpretim blīvuma gradienta centrifugēšana atdala daļiņas maisījumā, pamatojoties uz daļiņu blīvumu.
