Galvenā atšķirība starp HPLC un ātro HPLC ir tāda, ka sūkņa spiediens, ko izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa, turpretim sūkņa spiediens ātrai HPLC ir aptuveni 3–5 MPa.
Visizplatītākā metode, ko mēs izmantojam maisījuma sastāvdaļu atdalīšanai, ir “šķidruma hromatogrāfija”. Šī mērķa sasniegšanai ir vairākas metodes, no kurām HPLC ir ļoti populāra. HPLC nozīmē augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfiju, kas ātri un efektīvi identificē, kvantitatīvi nosaka un atdala šķidrā maisījuma sastāvdaļas. Ātrā HPLC ir īpaša HPLC lietojumprogramma, kas pēdējā laikā ir pievērsusi risinājumu izpētē iesaistīto personu uzmanību.
Kas ir HPLC?
HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. Tas izmanto augstu spiedienu, lai izspiestu šķīdinātājus tā, lai tie izietu cauri kolonnai. Tas ir arī ideāls veids, kā atdalīt un pētīt dažādus savienojumus, piemēram, aminoskābes, nukleīnskābes, ogļhidrātus, steroīdus, antibiotikas un ogļūdeņražus. HPLC ir daudz priekšrocību salīdzinājumā ar citām maisījumu atdalīšanas metodēm, piemēram, augstāka izšķirtspēja un ātrāka analīze. Tas novērš nepieciešamību pēc pārsaiņošanas un reģenerācijas un piedāvā labāku parametru kontroli, tādējādi palielinot atdalīšanas efektivitāti. Ideālā gadījumā HPLC ir piemērots liela mēroga lietojumiem, jo tas var atdalīt ļoti mazas daļiņas un ļauj izmantot augstu spiedienu, kas atvieglo šķīdinātāju plūsmu.
01. attēls: HPLC kolonna
Īsumā HPLC tehnikas darbības metode ir šāda. Pirmkārt, mums vajadzētu ievadīt paraugu mobilās fāzes plūsmā diskrētos nelielos daudzumos, izmantojot sūkni. Sūkņa spiediens jāuztur 40 MPa. Šī kustīgās fāzes plūsma izplūst caur HPLC kolonnu. Tad arī paraugā esošās sastāvdaļas iziet cauri kolonnai. Tomēr to kustības ātrums atšķiras viens no otra, jo atšķiras mijiedarbība starp parauga komponentiem un adsorbentu kolonnas iekšpusē. Mēs šo adsorbentu saucam par stacionāro fāzi, jo tas atrodas kolonnas iekšpusē (nepārvietojas). Pēc tam kolonnas beigās mēs varam savākt paraugu, kas eluē no kolonnas, tādējādi mēs varam savākt paraugā esošās sastāvdaļas atsevišķi.
Kas ir ātrā HPLC?
Nesen Schering Plow pētniecības institūta pētnieki izstrādāja ātrās HPLC metodi, kas ir uzlabota HPLC versija, jo tā ļauj vēl ātrāk atdalīt savienojumus no maisījuma. Šis paņēmiens, kas pazīstams arī kā ātrā HPLC, izmanto 2,7 um kausēta kodola silīcija dioksīda daļiņas, kuras iegūst, sakausējot 0,5 um porainu silīcija dioksīdu uz cietas silīcija dioksīda daļiņas. Šīs unikāli izgatavotās daļiņas padara atdalīšanas procedūru ļoti ātru, turklāt ar zemu pretspiedienu nekā tas, ko mēs izmantojam HPLC.
Attēls 02: FPLC aparāts
Ātrais HPLC iegūst rezultātus, kas salīdzināmi ar UPLC, taču zinātnieki uzskata, ka šī metode ir pārāka, jo tai nav nepieciešamas ļoti dārgas ultraaugstspiediena iekārtas. Lieliski ir tas, ka ātrai HPLC nav nepieciešami jauni laboratorijas protokoli.
Kāda ir atšķirība starp HPLC un ātro HPLC?
HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija, un ātrā HPLC ir uzlabota augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijas forma. Galvenā atšķirība starp HPLC un ātro HPLC ir tāda, ka sūkņa spiediens, ko izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa. Tā kā sūkņa spiediens ātrai HPLC ir aptuveni 3–5 MPa. Turklāt mēs varam atdalīt dažādus savienojumus, piemēram, aminoskābes, nukleīnskābes, ogļhidrātus, steroīdus, antibiotikas un ogļūdeņražus, izmantojot HPLC paņēmienu, savukārt ātro HPLC metodi galvenokārt izmanto proteīnu atdalīšanai.
Tālāk esošajā infografikā ir sniegta plašāka informācija par atšķirību starp HPLC un ātro HPLC.
Kopsavilkums - HPLC pret ātro HPLC
HPLC ir šķidrumu hromatogrāfijas tehnika, kas ir kļuvusi ļoti populāra visā pasaulē. Fast HPLC ir jauna HPLC versija, Schering Plow institūta pētnieki izstrādāja šo jauno tehniku. Galvenā atšķirība starp HPLC un ātro HPLC ir atkarīga no sūkņa spiediena, ko mēs izmantojam atdalīšanai. Tas ir; sūkņa spiediens, ko izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa. Taču sūkņa spiediens ātrai HPLC ir aptuveni 3–5 MPa.
