Galvenā atšķirība - HPLC un HPTLC
Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tāda, ka HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, turpretim HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
Hromatogrāfija ir fiziskas atdalīšanas metode, ko izmanto maisījuma komponentu atdalīšanai un identificēšanai. Gan HPLC, gan HPTLC ir hromatogrāfijas metodes. HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. HPTLC ir augstas veiktspējas plānslāņa hromatogrāfija.
Kas ir HPLC?
HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija. Tā ir analītiska metode, ko izmanto maisījuma komponentu atdalīšanai, identificēšanai un kvantitatīvai noteikšanai. Šajā tehnikā paraugu izšķīdina piemērotā šķīdinātājā. Pēc tam šķīdinātāju ar paraugu izlaiž caur sūkni ar noteiktu spiedienu. Sūknis ir piepildīts ar cietu adsorbējošu materiālu. Tad daži komponenti stipri saistās ar absorbējošo materiālu, bet citi komponenti brīvi. Tas izraisa to, ka komponentiem ir atšķirīgs plūsmas ātrums caur sūkni. Tāpēc sastāvdaļas var viegli atdalīt.
Attēls 01: HPLC sistēma
Adsorbējošais materiāls, kas piepilda sūkni, ir pazīstams kā stacionārā fāze. Šķīdinātāju ar izšķīdušo paraugu sauc par kustīgo fāzi. Šajā tehnikā izmantoto sūkni sauc par kolonnu. Kolonna ir piepildīta ar adsorbējošu materiālu, visbiežāk ar silīcija dioksīda daļiņām. Šo daļiņu izmērs var būt no 2 līdz 50 μm. Atdalīšanas procesu ietekmē kustīgās fāzes sastāvs un sistēmas temperatūra. Mijiedarbība starp stacionāro fāzi un komponentu paraugā var būt hidrofobiska mijiedarbība, dipola-dipola mijiedarbība, jonu saite utt.
HPLC darbības spiediens ir ievērojami augstāks nekā tradicionālajā šķidruma hromatogrāfijā. Tas ir aptuveni 50-350 bāri. Atšķirība starp šķidruma hromatogrāfiju un HPLC ir tāda, ka šķidruma hromatogrāfijā paraugs gravitācijas ietekmē izkrīt caur kolonnu, savukārt HPLC paraugs tiek pakļauts spiedienam caur kolonnu. Arī kolonnas izmērs un absorbējošās daļiņas ir ļoti mazas, salīdzinot ar tradicionālo šķidruma hromatogrāfiju. Tomēr izšķirtspēja, ko nodrošina HPLC tehnika, ir labāka.
Kas ir HPTLC?
HPTLC ir augstas veiktspējas plānslāņa hromatogrāfija. Tā ir tradicionālās TLC uzlabotā un automatizētā forma. Šis paņēmiens nodrošina efektīvu izšķirtspēju īsā laika periodā. Izmantojot šo analīzes metodi, paraugu un atsauci var analizēt vienlaikus, kas ļauj salīdzināt paraugu ar atsauci. Tas nodrošina uzlabotu analītisko precizitāti nekā citas hromatogrāfijas metodes. Analīzei nepieciešamais laiks ir mazāks. Šī metode ir zemu izmaksu tehnika.
Attēls 02: Pārtikas krāsvielu analīze, izmantojot HPTLC
HPLC metode ir vienkāršs process, un arī parauga sagatavošanas posms ir izslēgts (tradicionālajā TLC parauga sagatavošanas posms ir iekļauts pirms atdalīšanas. Šis solis ietver tīrīšanu un bagātināšanu). Šķīdinātāju var lietot tieši bez iepriekšējas apstrādes, lai gan citām hromatogrāfijas metodēm ir nepieciešama priekšapstrāde, piemēram, degazēšana, filtrēšana utt.
HPTLC izmantotais adsorbējošais materiāls ir silīcija dioksīds ar ļoti mazu daļiņu izmēru. Tradicionālajā TLC silīcija dioksīda daļiņu izmērs ir 5–20 μm, savukārt HPTLC tas ir 4–8 μm. Paraugu uzklāj uz HPTLC plāksnes, izmantojot aplikatoru. Tas nodrošina vienmērīgu un drošu pielietojumu. Pēc tam plāksnes ievieto kamerā, kurā ir kustīgā fāze. Kamerai jābūt piesātinātai ar kustīgās fāzes tvaikiem. Pēc HPTLC procesa var noteikt izkustētos plankumus. Nosakot plankumus uz plāksnes, HPTLC metode izmanto piemērotu UV apgabalu vai joda kameru.
Kāda ir atšķirība starp HPLC un HPTLC?
HPLC pret HPTLC |
|
| HPLC ir augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija. | HPTLC ir augstas veiktspējas plānslāņa hromatogrāfija. |
| Tehnika | |
| HPLC mobilā fāze ar šķīdinātāju tiek izlaista caur kolonnu, kas piepildīta ar stacionāro fāzi. | HPLC paraugs tiek uzklāts uz TLC plāksnes un ievietots kamerā, kurā atrodas kustīgā fāze; tad paraugam ļauj migrēt augšup pa plāksni kopā ar kustīgo fāzi. |
| Mērīšana | |
| HPLC komponentu plūsmas ātruma atšķirības caur kolonnu izmanto, lai atdalītu komponentus paraugā. | HPTLC katra parauga komponenta nobraukto attālumu atšķirības izmanto, lai atdalītu komponentus paraugā. |
| Kvantitatīvā atdalīšana | |
| HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. | HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. |
Kopsavilkums - HPLC pret HPTLC
HPLC un HPTLC ir divas hromatogrāfijas metodes. Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tāda, ka HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, turpretim HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
