Galvenā atšķirība - primārā šūnu kultūra pret šūnu līniju
Pētniecības joma ir piedzīvojusi lielu pavērsienu, ieviešot šūnu kultivēšanu un šūnu līniju izmantošanu pētniecībā. Mākslīgi sagatavotām šūnām un šūnu līnijām tiek veikti dažādi testi, lai novērtētu šūnas uzvedību. Lielākajai daļai cilvēku veikto pētījumu ir nepieciešama šūnu kultivēšana un šūnu līnijas, lai apstiprinātu rezultātus, jo īpaši, ja pētījumu pamatā ir farmakoloģija un zāļu atklāšana. Primārā šūnu kultūra ir kultūra, kas iegūta, tieši izolējot šūnas ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm. Šūnu līniju sagatavo, nepārtraukti izlaižot primāro šūnu kultūru, lai iegūtu šūnu līniju, kas ir ieguvusi homologas rakstzīmes. Galvenā atšķirība starp primāro šūnu kultūru un šūnu līniju ir katrai no tām paredzētais caurlaidības reižu skaits. Primārā šūnu kultūra tiek tieši izolēta, savukārt šūnu līnija tiek sagatavota, vairākas reizes izlaižot primāro šūnu kultūru.
Kas ir primārā šūnu kultūra?
Primārā šūnu kultūra ir šūnu kultūras preparāts, ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm izolējot šūnas tieši no avota. Šūnas tiek izolētas ar tripsinizācijas vai netripsinizācijas metodēm. Primārās šūnu kultūras audzē piemērotā augšanas barotnē, kas satur augšanas faktorus, hormonus, lipīdus un citus nenoteiktus komponentus. Dažām barotnēm ir jāpievieno serums. Barotne nodrošina, ka tiek optimizēti augšanas apstākļi, un šūnas izdzīvo optimālos apstākļos. Šūnas var izolēt no dažādiem audu avotiem, piemēram, aknu audiem, endotēlija un nervu audiem cilvēkiem vai augstākiem dzīvniekiem, izmantojot tripsinizāciju.
Izolējot šūnas no augiem un mikroorganismiem, tiek izmantotas īpašas ekstrakcijas procedūras, kurās izmanto gan mehāniskās, gan ķīmiskās metodes. Šīs izolētās šūnas var imobilizēt uz cieta balsta vai nodot vairākām paaudzēm, lai tās izveidotu šūnu līnijā.
Primārās šūnu kultūras galvenokārt ir divu veidu; Adherentās šūnu kultūras un suspensijas šūnu kultūras. Adherentās primārās šūnu kultūras ir atkarīgas no stiprinājuma, un tām ir nepieciešams stabils atbalsts augšanai. Adherentās primārās šūnu kultūras galvenokārt tiek iegūtas no audiem vai orgāniem. Suspensijas primārās šūnu kultūras ir neatkarīgas no stiprinājuma, un tās aug šķidrā barotnē. Suspensijas kultūras augšanas fāzē nepārtraukti jāmaisa. Suspensijas primārās šūnu kultūras var iegūt tieši no asinīm.
Primārajām šūnu kultūrām ir salīdzinoši mazāks dzīves ilgums, taču informācija, kas iegūta no primārajām šūnu kultūrām in vitro apstākļos, ir daudzu pētījumu pamats. Tie ir noderīgi, lai pētītu šūnu īpašības, gan morfoloģisko, gan ķīmisko uzvedību.
Kas ir šūnu līnija?
Šūnu līnijas tiek plaši izmantotas pētniecībā, un šobrīd pētniecības nolūkos ir komerciāli pieejamas tādas šūnu līnijas kā vēža šūnu līnijas, aknu šūnu līnijas un nieru šūnu līnijas. Šūnu līnijas sagatavo, nepārtraukti izlaižot primāro šūnu kultūru. Pasāža attiecas uz subkultūras procesu, kurā šūnu kultūras tiek pārveidotas par šūnu līniju. Šīs šūnu līnijas ir kultūras divdimensiju vai trīsdimensiju matricās un tiek uzturētas kā šūnu līnijas.
Šūnu līnijas tiek klasificētas kā ierobežotas un nepārtrauktas šūnu līnijas. Ierobežotas šūnu līnijas tiek pakļautas noteiktam pasāžas skaitam (20–30 pasāžas). Pabeidzot nepieciešamo pasāžu skaitu, šūnu līnija nonāk novecošanās stadijā. Šīs šūnas ir viegli apstrādājamas, jo to augšana ir noteikta. Nepārtrauktās šūnu līnijas tiek sauktas arī par iemūžinātām šūnu līnijām. Šīm šūnu līnijām nav noteikta fragmentu skaita. Viņi aug bezgalīgi un tādējādi spēj iegūt mutācijas. Tāpēc nepārtrauktas šūnu līnijas ir viegli mutācijas un tādējādi mainās to morfoloģiskās un ģenētiskās īpašības, atšķirībā no ierobežotām šūnu līnijām.
Attēls 01: Šūnas līnija
Šūnu līnijas tiek izmantotas, jo tas ir ērtāk nekā primārās šūnu kultūras izmantošana, jo to noteiktu laiku var izmantot atkal un atkal. Bet tas ir vairāk pakļauts mutācijām un piesārņojumam, jo palielinās to izplatība.
Kādas ir līdzības starp primāro šūnu kultūru un šūnu līniju?
- Pētījumos tiek izmantotas gan šūnu kultūras, gan šūnu līnijas šūnas, lai pētītu šūnas morfoloģiskās, ķīmiskās un ģenētiskās īpašības.
- Gan šūnu kultūras, gan šūnu līnijas tipa šūnas tiek ekstrahētas ar mehāniskām un fermentatīvām metodēm.
- Gan šūnu kultūras, gan šūnu līnijas tipa šūnām nepieciešama augšanas barotne un specifiski augšanas apstākļi.
- Gan šūnu kultūras, gan šūnu līnijas tipa šūnas ir pakļautas mutācijām.
Kāda ir atšķirība starp primāro šūnu kultūru un šūnu līniju?
Primārā šūnu kultūra pret šūnu līniju |
|
| Primārā šūnu kultūra ir kultūra, kas sagatavota, tieši izolējot šūnas ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm. | Šūnu līniju sagatavo, nepārtraukti izlaižot primāro šūnu kultūru, lai iegūtu šūnu līniju, kas ir ieguvusi homologas pazīmes. |
| fragmentu skaits | |
| Primārās šūnu kultūras netiek pasētas, šūnas tiek uzturētas kultivēšanas apstākļos. | Šūnas tiek pasētas noteikti vai neierobežoti, veidojot šūnu līnijas. |
| Veidi | |
| Adherent primārā šūnu kultūra un suspensijas primārā šūnu kultūra ir divu veidu primārās šūnu kultūras. | Galīga šūnu līnija un nepārtraukta šūnu līnija ir divu veidu šūnu līnijas. |
| Dzīves ilgums | |
| Primārajām šūnu kultūrām ir īss mūžs. | Šūnu līnijām ir ilgāks kalpošanas laiks. |
Kopsavilkums - primārā šūnu kultūra pret šūnu līniju
Primārās šūnu kultūras un šūnu līnijas plaši izmanto pētījumos, lai pētītu dažādu šūnu uzvedības modeļus dažādos apstākļos un dažādos farmakoloģiskajos aspektos. Primārās šūnu kultūras tiek tieši izolētas no avota orgāna vai audiem un tiek audzētas barotnē. Apstākļi ir optimizēti konkrētu šūnu augšanai. Turpretim šūnu līnijas tiek sagatavotas, izlaižot primārās šūnu kultūras ierobežotu vai bezgalīgu skaitu reižu. Šūnu līnijas ir komerciāli pieejamas, un tās ir populāras pētnieku vidū, jo tās ir viegli lietojamas.
