Galvenā atšķirība - CFU pret MPN
Koloniju veidojošā vienība (CFU) un visticamākais skaitlis (MPN) ir divas metodes, ko izmanto, lai uzskaitītu mikroorganismus paraugos. Abi parametri tiek izmantoti, lai noteiktu ūdens kvalitāti un fekāliju indikatorbaktēriju ūdens paraugos. Koloniju veidojošā vienība ir mērs, ko izmanto, lai uzskaitītu dzīvotspējīgo baktēriju šūnu vai sēnīšu šūnu skaitu konkrētā parauga tilpumā vai svarā. Šī parametra standarta mērvienība ir KVV/ml vai KVV/g. Visticamākais skaitlis ir cita vienība, ko izmanto, lai izmērītu dzīvotspējīgo baktēriju šūnu skaitu šķidrā paraugā. Galvenā atšķirība starp CFU un MPN ir tāda, ka CFU aprēķina no baktēriju un sēnīšu kolonijām, kas aug uz cietas agara plāksnes, savukārt MPN aprēķina no dzīvotspējīgām baktērijām, kas aug šķidrā vidē.
Kas ir CFU?
Koloniju veidojošā vienība (CFU) ir parametrs, kas mēra dzīvotspējīgo baktēriju vai sēnīšu šūnu skaitu noteiktā paraugā. Metode, kas uzskaita kolonijas veidojošās vienības, tiek saukta par standarta plākšņu skaitu. Dzīvotspējīgās kolonijas, kas parādās agara plāksnēs, ir izteiktas kā KVV uz 1 ml (koloniju veidojošā vienība mililitrā) parauga šķidrumiem vai KVV uz 1 g (koloniju veidojošā vienība uz vienu gramu) parauga cietām vielām.
CFU mērīšanai paraugā izmanto divas izplatītas metodes. Tie ir izkliedētās plāksnes metode un ielej plate metode. Šīs divas metodes atbalsta paņēmiens, ko sauc par sērijveida atšķaidīšanu. Sērijveidā atšķaidīti paraugi ļauj iegūt saskaitāmu skaitu koloniju uz agara virsmas. Zināmu parauga tilpumu var uzklāt uz agara plāksnes virsmas vai sajaukt ar agaru un izliet uz plāksnes. Pēc tam plāksni inkubē un saskaita radušās kolonijas. Koloniju skaits ir saistīts ar mikroorganismu skaitu sākotnējā paraugā. Plāksnes, kurās ir pārāk daudz koloniju vai pārāk maz koloniju, tiek izslēgtas no skaitīšanas, jo rezultāti šajās plāksnēs var nebūt statistiski precīzi. Statistiski labākais diapazons ir 30–300 kolonijas agara plāksnē. Tāpēc precīzai uzskaitei ir jāizvēlas pareizās plāksnes. Iepriekš minētajai funkcijai tiek veikta sērijveida atšķaidīšana.
Kad esat saskaitījis dzīvotspējīgo koloniju skaitu uz plāksnēm, KVV/ml var aprēķināt, izmantojot šādu vienādojumu.
KVV uz ml sākotnējā parauga=koloniju skaits uz plāksnes X atšķaidījuma koeficients
Atšķaidīšanas koeficients=(1/ plāksnes atšķaidījums)
Piemēram, ja uz 10-4 atšķaidījuma plāksnes iegūstat 149 kolonijas, tad baktēriju skaitu 1 ml sākotnējā parauga var aprēķināt šādi.:
KVV/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 vai 1490000
=1. 49 x 106
Attēls 01: Koloniju veidošanas vienība
Kas ir MPN?
Visticamākais skaitlis ir alternatīvs rādītājs KVV/ml. MPN arī novērtē dzīvotspējīgās šūnas šķidrā paraugā. Tā uzskaita organismus, kas aug šķidrā kultūrā, un ir galvenokārt bakterioloģiska tehnika. Šī metode ir īpaši noderīga paraugiem, kas satur zemu baktēriju šūnu koncentrāciju; piemēram, piens, dzeramais ūdens utt. MPN vērtību izsaka 100 ml tilpuma. MPN balstās uz statistikas metodi, kuras pamatā ir varbūtības teorija. Ir statistikas tabulas, kas paredzētas MPN vērtību noteikšanai uz 100 ml parauga. Šajās tabulās ir parādīti rezultāti ar 95% ticamības robežām.
MPN vērtība tiek aprēķināta pēc metodes, ko sauc par vairāku cauruļu fermentācijas metodi, veikšanas. Trīs mēģeņu komplektus, kuros ir piemērota barotne, inokulē ar trīs dažādiem parauga tilpumiem, piemēram, 10 ml, 1 ml un 0.1 ml un inkubē augšanai. Pēc inkubācijas perioda mēģenes tiek novērtētas ar atzīmi + (pozitīvs) vai – (negatīvs) attiecībā uz augšanas esamību vai neesamību. Pēc tam pozitīvo un negatīvo rezultātu modelis tiek salīdzināts ar MPN statistisko varbūtību tabulu, lai novērtētu mikroorganismu skaitu. Tad MPN vērtību uzrāda 100 ml parauga. MPN tiek plaši izmantots, lai noteiktu koliformas baktērijas ūdens paraugos.
2. attēls: MPN tabula
Kāda ir atšķirība starp CFU un MPN?
CFU pret MPN |
|
| CFU ir mērs, ko izmanto, lai izteiktu dzīvotspējīgo baktēriju vai sēnīšu koloniju skaitu noteiktā paraugā. | MPN ir alternatīvs pasākums CFU un mēra dzīvotspējīgo baktēriju šūnu skaitu šķidrā paraugā. |
| Vienība | |
| KVV/ml vai KVV/g | MPN/100 ml |
| Aprēķins | |
| KVV tiek aprēķināts, saskaitot uz agara plāksnēm izaudzēto koloniju skaitu. | MPN aprēķina, salīdzinot mēģenes pozitīvos un negatīvos modeļus ar MPN statistikas tabulu. |
| Sērijveida atšķaidīšanas tehnika | |
| Sērijveida atšķaidīšana tiek veikta pirms paraugu ievietošanas agara plāksnēs. | Sērijveida atšķaidīšana parasti netiek veikta, kad tiek aprēķināts MPN |
| Metodes | |
| Izkliedēšanas plāksnes metode un izliešanas plāksnes metode ir divu veidu metodes, ko veic, lai iegūtu CFU. | Vairāku cauruļu fermentācija ir metode, ko veic, lai iegūtu MPN vērtību. |
Kopsavilkums - CFU pret MPN
Mikrobu augšanas mērīšana ir nepieciešama daudzu iemeslu dēļ. Pārtikas pārstrādes uzņēmumos ir nepieciešams izmērīt mikroorganismu līmeni un veidu pārtikā. Pārtikas rūpniecībā un medicīnā nepieciešams nodrošināt efektīvu sterilizācijas procedūru piemērošanu. Notekūdeņu attīrīšanas iekārtās regulāri jāveic mikrobu skaits. Optimizējot procedūru molekulārajā bioloģijā, ir nepieciešams izmērīt koloniju skaitu uz plāksnēm. Tādējādi ir pieejamas dažādas uzskaitīšanas un izaugsmes mērīšanas metodes. CFU un MPN ir divas šādas metodes, ko plaši izmanto dažādās jomās. CFU ir noteiktā paraugā esošo dzīvotspējīgo baktēriju un sēnīšu koloniju skaita rādītājs. To aprēķina, izmantojot standarta plākšņu skaitīšanas metodi vai dzīvotspējīgo platību skaitīšanas metodi. MPN ir vēl viens rādītājs, kas izsaka baktēriju šūnu skaitu, kas atrodas noteiktā šķidruma parauga tilpumā. To aprēķina, izmantojot vairāku cauruļu fermentācijas metodi un MPN tabulu. Šī ir atšķirība starp CFU un MPN.
Lejupielādēt PDF versiju CFU vs MPN
Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistē, kā norādīts citēšanas piezīmēs. Lūdzu, lejupielādējiet PDF versiju šeit. Atšķirība starp CFU un MPN.
